Hauptunterschied – In-situ-Hybridisierung vs. Immunhistochemie
Die Diagnostik von Krebs- und Infektionskrankheiten ist ein beliebter Trend, bei dem neuartige auf Proteomik und Genomik basierende Techniken zum Zweck der Identifizierung von Tumoren oder infektiösen Zellen, ihrer Proliferation und der Orte der Zellentwicklung und der Analyse der genetischen Basis der am meisten übertragbaren und nicht übertragbare Krankheiten. Dies wird zu einer genauen Arzneimittelverarbeitung und -gest altung sowie zur Entwicklung maßgeschneiderter Therapien für Krankheiten führen. In-situ-Hybridisierung (ISH) und Immunhistochemie (IHC) sind zwei weit verbreitete Techniken in der Krebsbiologie, und der Hauptunterschied zwischen In-situ-Hybridisierung und Immunchemie liegt in den Molekülen, die im Analyseverfahren verwendet werden. Bei der ISH werden die Nukleinsäuresonden zur Analyse verwendet, während bei der IHC monoklonale und polyklonale Antikörper für die diagnostischen Bestimmungen verwendet werden.
Was ist In-situ-Hybridisierung (ISH)?
In-situ-Hybridisierung ist eine Nukleinsäure-Hybridisierungstechnik, die direkt an einem Teil oder Abschnitt eines Gewebes, im gesamten Gewebe oder in Zellen durchgeführt wird. Die Technik hängt von der Theorie der komplementären Basenpaarung von Watson Crick ab, was entweder zu DNA-DNA-Hybriden oder DNA-RNA-Hybriden führt, die mutierte Gene nachweisen oder das gewünschte interessierende Gen identifizieren können. Einzelsträngige DNA-Sequenzen, doppelsträngige DNA-Sequenzen, einzelsträngige RNA-Sequenzen oder synthetische Oligonukleotidsequenzen werden als Sonden während der Hybridisierungstechnik verwendet, und diese Sonden werden mit einem radioaktiven Phosphor an ihrem 5'-Ende für Identifizierungsverfahren bei der Autoradiographie markiert oder unter Verwendung von Fluoreszenzfarbstoffen markiert. Je nach Art der verwendeten Sonde und Art der angewendeten Visualisierungstechnik stehen verschiedene Arten von ISH-Techniken zur Verfügung.
Abbildung 01: Fluoreszenz-In-situ-Hybridisierung
Es gibt viele Anwendungen der ISH, hauptsächlich in der molekularen Diagnostik von Infektionskrankheiten, um das Vorhandensein von Krankheitserregern zu identifizieren und den Erreger molekulardiagnostisch zu bestätigen. Es wird auch in den Bereichen Entwicklungsbiologie, Karyotypisierung und phylogenetische Analyse und physikalische Kartierung von Chromosomen verwendet.
Was ist Immunhistochemie (IHC)?
In der IHC-Technik ist das hauptsächlich analysierte Molekül das Antigen. Während der IHC werden monoklonale und polyklonale Antikörper verwendet, um das Vorhandensein von Antigenen bei einer Infektion oder den Proliferationsstatus bösartiger Zellen zu bestimmen. Die Technik basiert auf der Antigen-Antikörper-Bindung, und für diese Technik werden Enzymmarkierungen verwendet; Eine solche Anwendung ist der ELISA (Enzyme Linked Immunosorbent Assay). Die Marker können auch fluoreszierend markierte Antikörper oder radiomarkierte Antikörper sein.
Abbildung 02: Immunhistochemie
IHC wird häufig zum Nachweis von Krebszellen eingesetzt. Die diagnostischen Verfahren zielen auf die auf den Tumorzellen vorhandenen Antigene ab, um den Tumor zu identifizieren und zu charakterisieren. Das gleiche Verfahren wird verwendet, um Infektionserreger zu diagnostizieren. Monoklonale und polyklonale Antikörper werden auch verwendet, um verschiedene Genprodukte zu analysieren, indem sie die Antikörper-Antigen-Bindungsreaktion zwischen dem gewünschten Protein und dem verabreichten synthetischen Antikörper ermöglichen.
Was sind die Ähnlichkeiten zwischen In-situ-Hybridisierung und Immunhistochemie?
- ISH und IHC sind hochspezifische Reaktionen.
- Beide Techniken sind sehr genau.
- Beide Techniken können in der Diagnostik von Krebs und Infektionskrankheiten eingesetzt werden.
- Diese Techniken werden in sterilen In-vitro-Umgebungen durchgeführt.
- Beides sind schnelle Techniken, die reproduzierbare Ergebnisse liefern.
- ISH und IHC verwenden Nachweismethoden wie Radiomarkierung und Fluoreszenztechniken.
Was ist der Unterschied zwischen In-situ-Hybridisierung und Immunhistochemie?
In-situ-Hybridisierung vs. Immunhistochemie |
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| ISH ist eine Nukleinsäure-Hybridisierungstechnik, die direkt an einem Teil oder Abschnitt eines Gewebes oder am gesamten Gewebe durchgeführt wird. | IHC ist eine Technik, bei der monoklonale und polyklonale Antikörper verwendet werden, um das Vorhandensein von Antigenen zu bestimmen, bei denen es sich um spezielle Proteinmarker handelt, die auf den Zelloberflächen platziert sind. |
| Art der analysierten Biomoleküle | |
| ISH analysiert Nukleinsäuren. | IHC analysiert Protein-Antigene. |
| Grundlage der biochemischen Reaktion | |
| Komplementäre Basenpaarung zwischen DNA-DNA oder DNA-RNA tritt bei dieser Technik auf. | Antigen-Antikörper-Wechselwirkungen sind an der Immunhistochemie beteiligt. |
| Enzymgebundene Nachweisverfahren | |
| Enzymgebundene Nachweismethoden können bei ISH nicht verwendet werden. | Enzymgebundene Nachweismethoden können bei IHC verwendet werden. |
Zusammenfassung – In-situ-Hybridisierung vs. Immunhistochemie
Molekulardiagnostik sind schnelle und bestätigende Methoden, mit denen eine nicht übertragbare Krankheit wie Krebs oder übertragbare Krankheiten wie HIV oder Tuberkulose anhand der molekularen Marker identifiziert werden können, die auf den Zellen vorhanden sind, die zur Manifestation der Krankheit führen. Molekulare Marker können in Form von exprimierten Proteinen oder auf genetischer Ebene vorhanden sein, auf deren Grundlage verschiedene neue Techniken eingeführt werden, um die Effizienz zu steigern, und sie sind weniger mühsam, obwohl mit diesen Techniken hohe Kosten verbunden sind. Somit hängt ISH von der DNA-DNA- oder DNA-RNA-Hybridbildung ab, und IHC hängt von den spezifischen Reaktionen zwischen Antikörper und Antigen ab. Dies ist der Unterschied zur In-situ-Hybridisierung.
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