Unterschied zwischen Immunzytochemie und Immunhistochemie

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Unterschied zwischen Immunzytochemie und Immunhistochemie
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Video: Was ist Immunhistochemie / Immunhistologie? Was sind Sekundärantikörper? 2024, November
Anonim

Hauptunterschied – Immunzytochemie vs. Immunhistochemie

Immunzytochemie (ICC) und Immunhistochemie (IHC) sind zwei weit verbreitete Techniken in der Molekulardiagnostik, die das Auftreten sowohl nichtübertragbarer Krankheiten als auch übertragbarer Krankheiten anhand der auf Zellen vorhandenen molekularen Marker identifiziert und bestätigt. Der Hauptunterschied zwischen Immunzytochemie und Immunhistochemie ist das Molekül, das bei diesen Techniken als Analyseverfahren verwendet wird. Bei ICC werden primäre und sekundäre Antikörper, die mit Markern wie Fluoreszenz konjugiert sind, verwendet, während IHC, monoklonale und polyklonale Antikörper für die diagnostischen Bestimmungen verwendet werden.

Was ist Immunzytochemie (ICC)?

ICC verwendet primäre und sekundäre Antikörper, die an Marker wie fluoreszierende Marker oder Enzyme gebunden sind, und ist eine leistungsstarke Nachweismethode zum Nachweis von Antigenen auf Zielzellen, bei denen es sich entweder um infektiöse Zellpartikel oder krebsartige Tumorzellen handeln kann. Für die Immunzytochemie sind drei Arten von Kontrollen erforderlich.

  • Primärer Antikörper – Kontrolle, die die Spezifität der Bindung des primären Antikörpers an das Antigen zeigt
  • Sekundärer Antikörper – Kontrolle, die zeigt, dass die Markierung spezifisch für den primären Antikörper ist
  • Etikettenkontrollen – zeigen, dass die Markierung das Ergebnis der hinzugefügten Markierung ist und nicht das Ergebnis einer endogenen Markierung.
Hauptunterschied - Immunzytochemie vs. Immunhistochemie
Hauptunterschied - Immunzytochemie vs. Immunhistochemie

Abbildung 01: Immunzytochemie markiert einzelne Proteine innerhalb von Zellen (hier ist Tyrosinhydroxylase in den Axonen sympathischer autonomer Neuronen grün dargestellt).

Die primäre Antikörperkontrolle ist spezifisch für jeden neuen Antikörper und kann nicht für jedes Experiment wiederholt werden. Die sekundäre Antikörperkontrolle wird basierend auf dem im Experiment verwendeten primären Antikörper entwickelt und ist in jedem Experiment enth alten. Die Markierungskontrolle wird eingeschlossen, wenn eine Bedingung des Verfahrens geändert wird, die Probe geändert wird oder wenn eine unerwartete Markierung gefunden wird.

Die zwei Hauptanwendungen von ICC sind Radio Immuno – Assay (RIA) und Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA). Der am häufigsten verwendete Antikörper ist das Immunglobulin G.

Was ist Immunhistochemie (IHC)?

In der Immunhistochemie enthält die Ausgangsprobe monoklonale und polyklonale Antikörper, um das Vorhandensein von Antigenen in fremden Zellen zu bestimmen. Diese Technik basiert auf der spezifischen Reaktion der Antigen-Antikörper-Bindung. Die zum Nachweis verwendeten Antikörper können mit verschiedenen Markern markiert werden; sie können Fluoreszenzmarker, radioaktiv markierte Marker oder chemische Marker sein. Durch die Erleichterung der In-vitro-Bindung zwischen dem Antigen und dem Zielantikörper kann das Vorhandensein oder Fehlen eines bestimmten Proteins einer Zelle bestimmt werden.

Unterschied zwischen Immunzytochemie und Immunhistochemie
Unterschied zwischen Immunzytochemie und Immunhistochemie

Abbildung 02: Immunhistochemische Färbung einer normalen Niere mit CD10

Derzeit sind Wissenschaftler an der Entwicklung von Zielantikörpern für spezifische Antigene beteiligt, die in Zellen vorhanden sind, die sich entweder als bösartige Tumorzellen entwickeln können, oder Antigene, die in Infektionserregern wie HIV vorhanden sind.

Was sind die Ähnlichkeiten zwischen Immunzytochemie und Immunhistochemie?

  • Reaktionen sind in ICC und IHC hochspezifisch und genau.
  • Die Anwendungen von ICC und IHC umfassen die Diagnostik von Krebs und Infektionskrankheiten.
  • In beiden Fällen sollten sterile Bedingungen aufrechterh alten und in vitro durchgeführt werden
  • Beide Techniken liefern reproduzierbare Ergebnisse.
  • Beide sind schnell.
  • Radiomarkierung, Fluoreszenztechniken werden als Nachweismethoden sowohl in ICC als auch in IHC verwendet.
  • Beide basieren auf Antigen-Antikörper-Paarung.

Was ist der Unterschied zwischen Immunzytochemie und Immunhistochemie?

Immunzytochemie (ICC) vs. Immunhistochemie (IHC)

ICC verwendet an primäre und sekundäre Antikörper gebundene Marker wie fluoreszierende Marker oder Enzyme und ist eine leistungsstarke Nachweismethode zum Nachweis von Antigenen, die auf Zielzellen vorhanden sind. IHC ist eine Methode, die monoklonale und polyklonale Antikörper verwendet, um das Vorhandensein von Antigenen zu bestimmen, die spezielle Proteinmarker sind, die auf den Zelloberflächen platziert werden.
Beispielquelle
Proben von Geweben, die histologisch zu Dünnschnitten verarbeitet wurden, werden in der ICC verwendet. IHC verwendet Proben, die aus in einer Monoschicht gezüchteten Zellen oder Zellen in Suspension bestehen, die auf einem Objektträger abgelegt werden.
Probenverarbeitung
Im ICC sollten die Zellen durchlässig sein, um das Eindringen von Antikörpern zu den intrazellulären Zielen zu erleichtern. In der IHC werden die Zellen vor dem Färben formalinfixiert und in Paraffin eingebettet.

Zusammenfassung – Immunzytochemie vs. Immunhistochemie

Molekulardiagnostik wird verwendet, um das Auftreten sowohl nichtübertragbarer als auch übertragbarer Krankheiten anhand der auf Zellen vorhandenen molekularen Marker zu identifizieren und zu bestätigen. Molekulare Marker können Proteine oder DNA- oder RNA-Sequenzen sein; Die Entwicklung von Technologien wie ICC und IHC haben Wissenschaftlern den Weg geebnet, um die Krankheit und ihre Ursache in einem frühen Stadium zu erkennen. Sowohl ICC als auch IHC hängen von den spezifischen Reaktionen zwischen Antikörper und Antigen ab, obwohl die Probenquelle. Der Hauptunterschied zwischen Immunzytochemie und Immunhistochemie besteht in der Probenaufbereitung der beiden Verfahren.

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