Der Hauptunterschied zwischen RIA und ELISA besteht darin, dass der Radioimmunoassay (RIA) eine Immunoassay-Technik ist, die Radioisotope verwendet, um Antigen-Antikörper-Komplexe nachzuweisen, während der Enzyme-linked Immunosorbent Assay (ELISA) eine Immunoassay-Technik ist, die Enzyme zum Nachweis von Antigen verwendet -Antikörperkomplexe.
Der Nachweis spezifischer Proteine wie Antigene ist für die Diagnose von Krankheiten äußerst wichtig. Daher sind RIA und ELISA zwei Immunoassay-Techniken, die in Laboratorien verwendet werden, um spezifische Proteine, insbesondere Antigene, schnell nachzuweisen. Im Allgemeinen bindet ein spezifischer Antikörper an das Zielantigen und bildet einen sichtbaren Komplex, der als Präzipitin bekannt ist. Diese Antikörper- und Antigenkomplexe können durch verschiedene Techniken identifiziert werden. Die Technik zum Nachweis des Antigen-Antikörper-Komplexes unter Verwendung von Radioisotopen ist als RIA bekannt, und die Technik zum Nachweis des Antigen-Antikörper-Komplexes unter Verwendung von Enzymen ist als ELISA bekannt.
Was ist RIA?
Radioimmunoassay (RIA) ist eine Immunoassay-Technik, die Antigen- und Antikörperkomplexe mithilfe von Radioisotopen nachweist. Rosalyn Sussman Yalow entwickelte diese Technik 1960 mit Hilfe von Solomon Berson. Für diese bemerkenswerte Entdeckung erhielt Rosalyn Sussman Yalow 1977 den Nobelpreis für Medizin. Typischerweise wird bei einem Radioimmunoassay zunächst eine bekannte Menge eines Antigens radioaktiv gemacht. Bei dieser Technik werden häufig gamma-radioaktive Isotope von Jod, genannt 125-I, zur Markierung verwendet Antigene. Diese Radioisotope lagern sich normalerweise an die Tyrosinaminosäure des Antigens an. Dann wird das radioaktiv markierte Antigen mit Antikörper gemischt. Als Ergebnis binden das radioaktiv markierte Antigen und der Antikörper spezifisch aneinander.
Später wird eine Serumprobe hinzugefügt, die eine unbekannte Menge desselben Antigens enthält. Dadurch konkurriert das unmarkierte Antigen aus dem Serum mit dem radioaktiv markierten Antigen um Antikörper-Bindungsstellen. Wenn die Konzentration des unmarkierten Antigens zunimmt, bindet mehr davon an den Antikörper und verdrängt die radioaktiv markierte Variante. Somit verringert es das Verhältnis von Antikörper-gebundenem radioaktiv markiertem Antigen zu freiem radioaktiv markiertem Antigen. Am Ende des Verfahrens werden die gebundenen Antigene abgetrennt. Abschließend wird die Radioaktivität freier Antigene im verbleibenden Überstand mit einem Gammazähler gemessen.
Was ist ELISA?
ELISA ist eine Immunoassay-Technik, die Antigen- und Antikörperkomplexe mithilfe von Enzymen nachweist. Es ist ein biochemischer analytischer Assay, der erstmals 1971 von Engvall und Perlmann beschrieben wurde. Bei den einfachsten Formen von ELISA-Techniken werden Antigene der Patientenprobe an eine feste Oberfläche gebunden. Dann wird ein passender Antikörper auf die Oberfläche aufgetragen, damit dieser an das Antigen binden kann.
Abbildung 01: ELISA
Dieser bestimmte Antikörper ist mit einem Enzym verbunden. Später werden alle ungebundenen Antikörper durch Waschen mit Detergens entfernt. Im letzten Schritt dieser Technik wird das Substrat des Enzyms hinzugefügt. Wenn es eine korrekte Bindung von Antigen und Antikörper gibt, erzeugt die anschließende Reaktion ein nachweisbares Farbsignal, am häufigsten eine Farbänderung.
Was sind die Ähnlichkeiten zwischen RIA und ELISA?
- RIA und ELISA sind Immunoassay-Techniken.
- Beide Techniken besitzen Antigen- und Antikörperkomplexbildung.
- Diese Techniken können verwendet werden, um unbekannte Proteine in Proben nachzuweisen.
- Sie werden beide zur Diagnose von Krankheiten in Laboratorien verwendet.
- Beides sind hochspezifische und empfindliche Techniken.
Was ist der Unterschied zwischen RIA und ELISA?
RIA ist eine Immunoassay-Technik zum Nachweis des Antigen-Antikörper-Komplexes unter Verwendung von Radioisotopen. ELISA ist eine Immunoassay-Technik zum Nachweis des Antigen-Antikörper-Komplexes unter Verwendung von Enzymen. Das ist also der Hauptunterschied zwischen RIA und ELISA. Darüber hinaus wird bei der RIA-Technik das Antigen markiert, aber bei ELISA wird der Antikörper markiert. Darüber hinaus sind Markierungsmoleküle bei der RIA-Technik Radioisotope, wohingegen Markierungsmoleküle bei ELISA Enzyme sind. Dies ist also ein weiterer Unterschied zwischen RIA und ELISA.
Die folgende Infografik zeigt weitere Unterschiede zwischen RIA und ELISA in tabellarischer Form.
Zusammenfassung – RIA vs. ELISA
Immunoassays spielen eine sehr wichtige Rolle in verschiedenen bioanalytischen Bereichen, wie z. B. in der klinischen Diagnostik, biopharmazeutischen Analyse, Umweltüberwachung, Biosicherheit und Lebensmittelprüfung. Seit den 1960er Jahren wurde eine breite Palette von Immunoassays entwickelt. RIA und ELISA sind beides Immunoassay-Techniken. RIA ist eine Immunoassay-Technik zum Nachweis eines Antigen-Antikörper-Komplexes unter Verwendung von Radioisotopen. ELISA ist eine Immunoassay-Technik zum Nachweis eines Antigen-Antikörper-Komplexes unter Verwendung von Enzymen. Dies ist also die Zusammenfassung des Unterschieds zwischen RIA und ELISA.
