Der Hauptunterschied zwischen Radioimmunoassay und immunradiometrischem Assay besteht darin, dass beim Radioimmunoassay die zu messende Probe oder Verbindung vor der Kombination mit einem radioaktiven Antigen kombiniert wird, während sich beim immunradiometrischen Assay die Probe oder Verbindung sofort mit dem radioaktiv markierten kombiniert Antikörper.
Ein Immunoassay ist ein biochemischer Test, der mithilfe eines Antikörpers oder Antigens das Vorhandensein oder die Konzentration von Makromolekülen in einer Lösung nachweist. Fluoreszierende und radioaktive Antikörper werden verwendet, um Antigene in einer Probe zu messen. Anfänglich wurden Antikörper in Präzipitationstechniken wie Immunpräzipitation, Immundiffusion und Immunelektrophorese für die Serumproteinanalyse verwendet. Gegenwärtig werden hochempfindliche Techniken wie Radioimmunassays und immunradiometrische Assays zur Messung von Medikamenten, Tumormarkern und Hormonen verwendet.
Was ist ein Radioimmunoassay-Assay?
Radioimmunoassay (RIA) ist ein Immunoassay, der radioaktive Elemente zur schrittweisen Bildung von Antigen-Antikörper-Komplexen verwendet. RIA verwendet normalerweise radioaktive Antikörper, um die Antigenmenge in einer Probe nachzuweisen. RIA ist ein sehr spezifischer und hochempfindlicher In-vitro-Assay. Das Prinzip hinter RIA ist kompetitive Bindung. Dabei konkurriert ein radioaktives Antigen mit einem nicht radioaktiven Antigen um eine konstante Menge an Antikörper- oder Rezeptorbindungsstellen. RIA erfordert spezielle Genehmigungen und Vorsichtsmaßnahmen, da radioaktive Substanzen verwendet werden, und sie gehört nach wie vor zu den kostengünstigsten Techniken.
Abbildung 01: Immunoassay
Während der RIA wird eine bekannte Antigenmenge häufig radioaktiv gemacht, indem sie mit gamma-radioaktiven Jodisotopen markiert wird, die an Tyrosin gebunden sind. Dann wird dieses Antigen mit einer bekannten Menge Antikörper kombiniert. Dabei binden sowohl Antigen als auch Antikörper spezifisch aneinander. Dann wird eine Blutserumprobe hinzugefügt, um eine Konkurrenzreaktion zwischen den markierten Antigenen und unmarkierten Antigenen im Serum mit spezifischen Antikörpern auszulösen. Bei dieser Reaktion setzen Antikörper eine bestimmte Menge an markiertem Antigen frei. Diese Menge ist proportional zum Verhältnis von markiertem zu unmarkiertem Antigen. Schließlich wird eine Bindungskurve erstellt, um die Antigenmenge im Blutserum eines Patienten abzuleiten.
Was ist ein immunradiometrischer Assay?
Immunradiometrischer Assay (IRMA) ist ein Immunoassay, der radioaktiv markierte Antikörper verwendet. Bei IRMA werden die Antikörper mit Radioisotopen markiert. Diese Antikörper binden an die in einer bestimmten Probe vorhandenen Antigene. In einer positiven Probe binden radioaktiv markierte Antikörper an die freien Epitope von Antigenen. Dies bildet einen Antigen-Antikörper-Komplex.
Während der zweiten Reaktion werden die ungebundenen markierten Antikörper mit einem Festphasenantigen entfernt. Die verbleibende Anzahl radioaktiver Antikörper in der Lösung ist eine direkte Funktion der Antigenkonzentration. IRMA ist als Assay mit überschüssigem Reagenz bekannt, bei dem eine überschüssige Menge an radioaktiv markiertem Antikörper als Reagenz verwendet wird. Hier lässt man eine überschüssige Konzentration an markiertem Antikörper oder Antigen reagieren. Als letzter Schritt werden die Antigen-gebundenen und freien Antikörper getrennt, und die Antigen-gebundene Fraktion wird radioaktiven Assays unterzogen. Dabei ist die Aktivität der Fraktion direkt proportional zur Konzentration des Antigens.
Was sind die Ähnlichkeiten zwischen Radioimmunoassay und immunradiometrischem Assay?
- Sowohl der Radioimmunoassay als auch der immunradiometrische Assay sind Immunoassays, die radioaktive Elemente zur schrittweisen Bildung von Antigen-Antikörper-Komplexen verwenden.
- Sie bilden einen Antigen-Antikörper-Komplex.
Was ist der Unterschied zwischen Radioimmunoassay und immunradiometrischem Assay?
Radioimmunoassay ist ein Immunoassay, der die Antikörperspiegel durch ein Antigen bestimmt, das mit einem Radioisotop markiert ist, während der immunradiometrische Assay ein Assay mit überschüssigem Reagenz ist, bei dem eine Überschusskonzentration an radioaktiv markiertem Antikörper verwendet wird. Dies ist also der Hauptunterschied zwischen Radioimmunoassay und immunoradiometrischem Assay. IRMA bietet eine höhere Empfindlichkeit als RIA. Bei RIA werden Antigene mit gamma-radioaktiven Jodisotopen markiert, während bei IRMA Antikörper mit Jodisotopen markiert werden. Dies ist also auch ein Unterschied zwischen Radioimmunoassay und immunoradiometrischem Assay. Da es sich bei IRMA um eine Technik mit überschüssigem Reagenz handelt, wird der Assay in kürzerer Zeit als RIA durchgeführt.
Die folgende Tabelle fasst die Unterschiede zwischen Radioimmunoassay und immunoradiometrischem Assay zusammen.
Zusammenfassung – Radioimmunoassay vs. immunradiometrischer Assay
Radioimmunoassay ist ein Immunoassay, der radioaktive Elemente in schrittweiser Bildung verwendet, um Antikörperspiegel zu bestimmen. RIA verwendet normalerweise radioaktive Antikörper. Ein radioaktives Antigen konkurriert mit einem nicht radioaktiven Antigen um eine konstante Menge an Antikörper- oder Rezeptorbindungsstellen. Der immunradiometrische Assay ist ein Immunoassay, der durchgeführt wird, um die Antigenspiegel einer Probe unter Verwendung von radioaktiv markierten Antikörpern zu bestimmen. Diese Antikörper binden an Antigene, die in einer bestimmten Probe vorhanden sind. Am Ende jedes Assays wird ein Antigen-Antikörper-Komplex gebildet. Um die Ergebnisse der Assays zu erh alten, wird eine Bindungskurve gezeichnet. Beim Radioimmunoassay ist die Menge des markierten Antigens proportional zum Verhältnis von markiertem zu unmarkiertem Antigen, aber bei einem immunoradiometrischen Assay ist die Aktivität der antigengebundenen Fraktion direkt proportional zur Konzentration des Antigens. Dies ist die Zusammenfassung des Unterschieds zwischen Radioimmunoassay und immunoradiometrischem Assay.
