Der Hauptunterschied zwischen HEK293 und HEK293t besteht darin, dass HEK293 eine unsterblich gemachte Zelllinie ist, die aus der embryonalen menschlichen Niere stammt, die mit gescherter menschlicher Adenovirus-Typ-5-DNA transfiziert ist, während HEK293t eine Tochterzelllinie ist, die von der ursprünglichen HEK293-Zelllinie abgeleitet ist transfiziert mit einem Plasmidvektor, der den SV40-Replikationsursprung trägt.
Transfektion wird üblicherweise definiert als der Vorgang des Einschleusens fremder DNA und RNA in Zellen, um deren Genotyp und Phänotyp zu beeinflussen. Solche Einschleusungen fremder Nukleinsäuren durch verschiedene biologische, chemische und physikalische Verfahren können die Eigenschaften der Zelle verändern. Letztendlich ermöglicht dies die Untersuchung von Genfunktion und Proteinexpression im Kontext der Zelle. HEK293 und HEK293t sind zwei Zelllinien, die aufgrund ihrer Neigung zur Transfektion seit vielen Jahren ausgiebig in der zellbiologischen Forschung eingesetzt werden.
Was ist HEK293?
HEK293 ist eine unsterblich gemachte Zelllinie, die aus der embryonalen menschlichen Niere stammt, die mit gescherter menschlicher Adenovirus-Typ-5-DNA transfiziert wird, um viele rekombinante Proteine zu produzieren. HEK293 wurden ursprünglich 1973 vom niederländischen Biologen Alex Van der Eb aus menschlichen Nierenzellen isoliert. Diese Zellen wurden in Gewebekulturen eines weiblichen Fötus gezüchtet. Später wurden sie von Frank Graham, einem Postdoktoranden in Van der Ebs Labor, mit gescherter menschlicher Adenovirus-Typ-5-DNA transfiziert. Diese Zelllinie wurde HEK293 genannt, weil es Franks 293rd Experiment war.
Abbildung 01: HEK293
Der Einbau von adenoviralen Genen in das HEK-Zellgenom ermöglicht es diesen Zellen, sehr effizient eine große Menge an rekombinanten Proteinen zu produzieren. Darüber hinaus enthält der adenovirale Vektor die CMV-Promotorregion; daher erhöht es diese Effizienz weiter. Diese Zelllinie wurde als Wirt für Genexpressionsstudien verwendet. Diese Zelllinie wird auch von der Biotechnologieindustrie verwendet, um therapeutische Proteine für die Gentherapie herzustellen.
Was ist HEK293t?
HEK293t ist eine Tochterzelllinie, die von der ursprünglichen HEK293-Zelllinie abgeleitet ist, die mit einem Plasmidvektor transfiziert ist, der den SV40-Replikationsursprung trägt, um eine große Menge an rekombinanten Proteinen zu produzieren. HEK293t ist eine menschliche Zelllinie, die eine mutierte Version des großen SV40-T-Antigens exprimiert. HEK293t wurde im Labor von Michele Carlos in Stanford durch stabile Transfektion der HEK29E-Zelllinie mit einem Plasmid erzeugt, das für eine temperaturempfindliche Mutante des SV40-Large-T-Antigens kodiert. Es wurde ursprünglich als 293/tsA1609neo bezeichnet. Dies liegt daran, dass die Transfektion verwendet wurde, um eine Zelllinie zu schaffen, die Neomycinresistenz und die Expression des tsA 1609-Allels des großen SV40-T-Antigens verleiht.
Abbildung 02: HEK293t
Aufgrund der Expression einer mutierten Version des großen SV40-T-Antigens können die transfizierten Plasmide mit SV40-Replikationsursprung die Menge an rekombinantem Protein stark erhöhen. Diese Zelllinie wird üblicherweise in der biotechnologischen Industrie für die Proteinexpression und die Produktion rekombinanter Retroviren verwendet.
Was sind die Ähnlichkeiten zwischen HEK293 und HEK293t?
- HEK293 und HEK293t sind zwei Zelllinien, die aufgrund ihrer Neigung zur Transfektion ausgiebig in der zellbiologischen Forschung verwendet wurden.
- Beide Zelllinien stammen aus dem Labor.
- Diese Zelllinien können die Menge an rekombinanter Proteinproduktion stark erhöhen.
- Sie werden durch Transfektion embryonaler menschlicher Nierenzellen mit einem Plasmidvektor hergestellt.
Was ist der Unterschied zwischen HEK293 und HEK293t?
HEK293 ist eine unsterblich gemachte Zelllinie, die aus der embryonalen menschlichen Niere stammt, die mit gescherter menschlicher Adenovirus-Typ-5-DNA transfiziert ist. Im Gegensatz dazu ist HEK293t eine Tochterzelllinie, die von der ursprünglichen HEK293-Zelllinie abgeleitet ist, die mit einem Plasmidvektor transfiziert ist, der den SV40-Replikationsursprung trägt. Dies ist also der Hauptunterschied zwischen HEK293 und HEK293t. Darüber hinaus exprimiert HEK293 nicht die mutierte Version des großen SV40-T-Antigens. Andererseits exprimiert HEK293t die mutierte Version des großen SV40-T-Antigens.
Die folgende Infografik listet die Unterschiede zwischen HEK293 und HEK293t in tabellarischer Form zum direkten Vergleich auf.
Zusammenfassung – HEK293 gegen HEK293t
HEK293 und HEK293t sind zwei Zelllinien, die aufgrund ihres stetigen Wachstums und ihrer Neigung zur Transfektion ausgiebig in der zellbiologischen Forschung eingesetzt wurden. HEK293 ist eine immortalisierte Zelllinie, die aus einer embryonalen menschlichen Niere stammt, die mit gescherter menschlicher Adenovirus-Typ-5-DNA transfiziert ist, während HEK293t eine Tochterzelllinie ist, die von der ursprünglichen HEK293-Zelllinie stammt, die mit einem Plasmidvektor transfiziert ist, der den SV40-Replikationsursprung trägt. Somit fasst dies den Unterschied zwischen HEK293 und HEK293t zusammen.
