Der Hauptunterschied zwischen Insertions- und Ersatzvektoren besteht darin, dass der Insertionsvektor in der Lage ist, Fremd-DNA mittlerer Länge einzufügen, während der Ersatzvektor in der Lage ist, größere Längen von Fremd-DNA aufzunehmen.
Phagenvektoren sind die zum Klonen verwendeten Bakteriophagen. Es gibt zwei Arten von Phagenvektoren; sie sind Insertionsvektor und Ersatzvektor. Außerdem bestehen alle Phagenvektoren aus nicht-essentiellen Genen. Diese Gene müssen jedoch aus Phagen entfernt werden, um neue Fremd-DNA-Inserts zu ermöglichen.
Was ist ein Einfügungsvektor?
Zunächst einmal ist der Insertionsvektor die einfachste Form von Lambda-Klonvektoren. Tatsächlich handelt es sich um eine Art Phagenvektor, der eine einzigartige Restriktionsstelle aufweist, die in das Vektorgenom an der Position optionaler DNA eingeführt wurde. Außerdem bleibt die Phagen-DNA ohne Entfernung. Diese Nicht-Entfernung der Phagen-DNA schränkt die Größe der zu klonierenden Inserts (Fremd-DNA) innerhalb des Vektors ein. Darüber hinaus sind diese Vektoren bei der cDNA-Klonierung und -Expression nützlich. GT10, GT11 und Zap sind Beispiele für diesen Vektor.
Abbildung 01: Lambda-Phage
Der Insertionsvektor besteht aus einer einzigen Erkennungsstelle. Die primäre Funktion dieses Vektors besteht darin, cDNA-Bibliotheken zu entwickeln, die von eukaryotischen mRNA-Sequenzen abgeleitet sind. Darüber hinaus kann es nur Längen von Fremd-DNA aufnehmen, die zwischen 05 und 11 kb liegen. Außerdem besitzt es eine einzigartige Sp altstelle für die Insertion fremder DNA.
Was sind Ersatzvektoren?
Ersatzvektor oder Substitutionsvektor ist eine Art Phagenvektor, der aus der Entfernung einer mittleren „Füllfragment“-Region der Phagen-DNA entwickelt wurde. Das gewünschte Fremd-DNA-Insert ersetzt die Phagen-DNA.
Abbildung 02: Ersatzvektor
Ersatzvektoren sind wichtig bei der Erstellung genomischer Bibliotheken wie EMBL4 und Charon40. Diese Vektoren können eine größere Länge fremder DNA im Bereich von 08-24 kb aufnehmen. Die Filler-Region besteht auch aus einem Gen, das den Phagenvektor in einem bakteriellen Wirt nicht lebensfähig macht.
Was sind die Ähnlichkeiten zwischen Einfügungs- und Ersetzungsvektoren?
- Insertions- und Ersetzungsvektoren sind Phagenvektoren.
- Beide Vektoren nehmen fremde DNA-Inserts auf.
- Beide sind hilfreich bei der Erstellung von DNA-Bibliotheken.
Was ist der Unterschied zwischen Einfügungs- und Ersatzvektoren?
Einfügung vs. Ersatzvektoren |
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| Insertionsvektor ist eine Art Phagenvektor, der eine Restriktionsstelle hat, die in das Phagengenom an der Stelle optionaler DNA eingeführt wurde. | Ersatzvektor ist eine Art Phagenvektor, der aus der Entfernung einer mittleren „Füllfragment“-Region der Phagen-DNA entwickelt wurde |
| Größe der Insert-Fragmente | |
| 05-11 kb Länge | 08-24 kb Länge |
| Füllfragment | |
| Kein Füllfragment | Füllfragment wird durch fremdes Insert ersetzt |
| Funktion | |
| Wichtig zum Erstellen von cDNA-Bibliotheken | Wichtig beim Erstellen von Genombibliotheken |
| Beispiele | |
| GT10, GT11 und Zap sind Beispiele | EMBL4 und Charon40 sind Beispiele |
| Sp altstelle | |
| Eine einzigartige Sp altstelle ist vorhanden | Sp altstelle enthält Gene, die für den lytischen Zyklus nicht essentiell sind |
Zusammenfassung – Insertion vs. Replacement Vectors
Sowohl Insertions- als auch Ersetzungsvektoren sind zwei Arten von Phagenvektoren. Beide Vektoren haben Restriktionsstellen, die die Aufnahme neuer fremder DNA-Inserts erleichtern. Insertionsvektoren sind wichtig bei der Erstellung von cDNA-Bibliotheken, während Ersatzvektoren bei der Erstellung genomischer Bibliotheken wichtig sind. Darüber hinaus beherbergen Insertionsvektoren DNA-Inserts mit einer moderaten Länge. Ersatzvektoren können jedoch größere Längen von Fremd-DNA-Inserts aufnehmen. Insgesamt ist dies der Hauptunterschied zwischen Insertions- und Ersetzungsvektoren.
