Der Hauptunterschied zwischen DNA- und RNA-Isolierung besteht darin, dass die DNA-Isolierung ein Verfahren ist, bei dem eine Art von Nukleinsäure namens DNA aus einer biologischen Zelle extrahiert wird, während die RNA-Isolierung ein Verfahren ist, bei dem eine Art von Nukleinsäure namens RNA ist extrahiert aus einer biologischen Zelle.
Die Isolierung von Nukleinsäuren ist der Ausgangspunkt für eine Vielzahl nachgesch alteter Anwendungen. Die hohe Qualität der Nukleinsäuren in den Ausgangsproben ist ein Schlüsselfaktor für den Erfolg nachfolgender Downstream-Anwendungen. Nukleinsäureisolierung könnte als eine Reihe von Schritten definiert werden, um Nukleinsäure in einer Reinheitsprobe zu erh alten, die für verschiedene nachgelagerte Anwendungsschritte verwendet werden kann. Der Zweck der Nukleinsäureextraktion besteht darin, die Zellmembran aufzulösen und die maximale Eliminierung von Lipiden und Proteinen zu erreichen, um reine Nukleinsäuren wie DNA oder RNA zu erh alten.
Was ist DNA-Isolierung?
Die DNA-Isolierung ist ein Routineverfahren, bei dem eine Art von Nukleinsäure namens DNA aus einer biologischen Zelle extrahiert wird. Die DNA-Isolierung wird durchgeführt, indem DNA aus Blut, gefrorenen Gewebeproben und Paraffin-Gewebeblöcken extrahiert wird. Es gibt drei Hauptschritte bei der DNA-Isolierung, einschließlich Zelllyse, DNA-Extraktion und Präzipitation. Bei der Zelllyse werden die Zellen in einer Probe oft durch physikalische Mittel wie Mahlen oder Vortexen voneinander getrennt und in eine salzh altige Lösung gegeben. Normalerweise tragen die positiv geladenen Natriumionen im Salz dazu bei, die negativ geladenen Phosphatgruppen zu schützen, die entlang des Rückgrats der DNA verlaufen. Später wird ein Detergens hinzugefügt, um die Lipide in der Zellmembran und den Kernen abzubauen, die DNA freisetzen, wenn diese Membranen zerstört werden.
Abbildung 01: DNA-Isolierung
Die DNA-Extraktion wird durchgeführt, um eine saubere DNA-Probe zu erh alten. Häufig wird ein Protease-Enzym hinzugefügt, um DNA-assoziierte Proteine und andere zelluläre Proteine abzubauen. Darüber hinaus kann ein Teil der Zelltrümmer durch Filtern der Probe entfernt werden. Abschließend wird die DNA mit Alkohol ausgefällt. Wenn viel DNA vorhanden ist, kann am Ende des Vorgangs außerdem ein hauchdünner weißer Niederschlag beobachtet werden.
Was ist RNA-Isolierung?
RNA-Isolierung ist ein Verfahren, bei dem eine Art von Nukleinsäure namens RNA aus einer biologischen Zelle extrahiert wird. Dieses Verfahren wird oft durch das Vorhandensein von Ribonuklease-Enzymen in Zellen und Geweben erschwert, die RNA abbauen. In der Molekularbiologie werden mehrere Methoden verwendet, um RNA aus Proben zu isolieren, wie z. B. die Guanidinium-Thiocyanat-Phenol-Chloroform-Extraktion.
Abbildung 02: RNA-Isolierung
RNA-Isolierung besteht in der Regel aus mehreren Schritten, darunter Zelllyse und Homogenisierung, Quenchen biochemischer Prozesse, Nukleinsäurepartitionierung, RNA-Gewinnung, grobe Reinigung und Bewertung der RNA-Qualität. Die filterpapierbasierte Lyse- und Elutionsmethode hat eine hohe Durchsatzleistung bei der RNA-Extraktion. Darüber hinaus ist die RNA-Extraktion in flüssigem Stickstoff mit Mörser und Pistill ebenfalls eine sehr nützliche Methode, da sie die Ribonuklease-Aktivität verhindert.
Was sind die Ähnlichkeiten zwischen DNA- und RNA-Isolierung?
- DNA- und RNA-Isolierung sind zwei Arten von Nukleinsäure-Isolierungsverfahren.
- Beide Verfahren haben ähnliche grundlegende Schritte wie Zelllyse, Extraktion und Reinigung.
- Diese Verfahren isolieren wichtige Nukleinsäuretypen, die eine Reihe nachgesch alteter Anwendungen haben.
- Sie werden in Laboraufbauten durchgeführt.
- Sie können mit hergestellten Kits durchgeführt werden.
Was ist der Unterschied zwischen DNA- und RNA-Isolierung?
Bei der DNA-Isolierung wird eine Nukleinsäure namens DNA aus einer biologischen Zelle extrahiert, während bei der RNA-Isolierung eine Nukleinsäure namens RNA aus einer biologischen Zelle extrahiert wird. Dies ist also der Hauptunterschied zwischen DNA- und RNA-Isolierung. Darüber hinaus wird die DNA-Isolierung normalerweise bei etwa pH 7 bis 8 durchgeführt, während die RNA-Isolierung normalerweise bei etwa pH 4,5 durchgeführt wird.
Die folgende Infografik zeigt die Unterschiede zwischen DNA- und RNA-Isolierung in tabellarischer Form zum direkten Vergleich.
Zusammenfassung – DNA vs. RNA-Isolierung
DNA- und RNA-Isolierung sind zwei Arten von Nukleinsäure-Isolierungsverfahren. Die DNA-Isolierung ist ein Verfahren, bei dem DNA aus einer biologischen Zelle extrahiert wird. Die RNA-Isolierung ist ein Verfahren, bei dem RNA aus einer biologischen Zelle extrahiert wird. Das ist also der Hauptunterschied zwischen DNA- und RNA-Isolierung.
