Der Hauptunterschied zwischen Affinitäts- und Ionenaustauschchromatographie besteht darin, dass wir Affinitätschromatographie verwenden können, um geladene oder ungeladene Komponenten in einem Gemisch zu trennen, während wir Ionenaustauschchromatographie verwenden können, um geladene Komponenten in einem Gemisch zu trennen.
Chromatographie ist eine Technik, mit der wir die gewünschten Komponenten in einem Gemisch trennen können. Es gibt verschiedene Arten wie Flüssigkeitschromatographie, Gaschromatographie usw. Die Affinitätschromatographie und die Ionenaustauschchromatographie sind zwei Unterkategorien der Flüssigkeitschromatographie. Auch bei diesen Techniken gibt es zwei Phasen. Sie sind nämlich die stationäre Phase und die mobile Phase. Der Zweck dieser Techniken besteht darin, die Komponenten, abhängig von der Bindung der Komponenten, in der mobilen Phase auf der Oberfläche der stationären Phase zu trennen.
Was ist Affinitätschromatographie?
Affinitätschromatographie ist eine biochemische Technik, die wir verwenden, um Komponenten in einer Mischung in Abhängigkeit von den Wechselwirkungen zwischen diesen Komponenten zu trennen.
Die Interaktionen, die wir in diesem Fall verwenden, beinh alten die folgenden:
- Antigen-Antikörper-Wechselwirkungen
- Enzym-Substrat-Wechselwirkungen
- Rezeptor-Ligand-Wechselwirkungen
- Protein-Nukleinsäure-Wechselwirkungen
Bei dieser Technik nutzen wir die molekularen Eigenschaften von Molekülen für diese Trenntechnik. Hier lassen wir zu, dass die gewünschte Verbindung mit einer stationären Phase über Wasserstoffbrückenbindungen, ionische Wechselwirkungen, Disulfidbrücken, hydrophobe Wechselwirkungen usw. wechselwirkt. Die Moleküle, die nicht mit der stationären Phase interagieren, werden zuerst eluiert. So können wir es von der Mischung trennen. Die gewünschte Verbindung bleibt an der stationären Phase gebunden. Daher können wir es mit einem Elutionslösungsmittel ablösen und eluieren lassen, um es ebenfalls zu trennen.
Abbildung 01: Eine chromatographische Säule
Affinitätschromatographie ist nützlich bei der Reinigung und Konzentration einer Substanz aus einem Gemisch unter Verwendung einer Pufferlösung. Außerdem ist es hilfreich, die unerwünschten Substanzen in einer Mischung zu reduzieren. Wenn wir die Apparatur betrachten, die wir für diesen Prozess verwenden, sollten wir eine Säule verwenden, die mit unserer stationären Phase gefüllt ist. Dann sollten wir die mobile Phase laden, die die Biomoleküle enthält, die wir trennen werden. Als nächstes lassen Sie sie mit der stationären Phase binden. Danach können wir unter Verwendung eines Waschpuffers die Nicht-Ziel-Biomoleküle trennen, aber die Zielmoleküle sollten eine hohe Affinität zur stationären Phase haben, um den Trennungsprozess erfolgreich durchzuführen.
Was ist Ionenaustauschchromatographie?
Ionenchromatographie ist eine Form der Flüssigkeitschromatographie, bei der wir ionische Substanzen analysieren können. Wir verwenden es häufig zur Analyse anorganischer Anionen und Kationen (z. B. Chlorid- und Nitratanionen sowie Kalium- und Natriumkationen). Obwohl es weniger üblich ist, können wir auch organische Ionen analysieren. Außerdem können wir diese Technik zur Aufreinigung von Proteinen verwenden, da Proteine bei bestimmten pH-Werten geladene Moleküle sind. Hier verwenden wir eine feste stationäre Phase, an der sich die geladenen Teilchen anlagern können. Beispielsweise können wir das Harz Polystyrol-Divinylbenzol-Copolymere als festen Träger verwenden.
Abbildung 02: Phasen der Ionenaustauschchromatographie
Um dies weiter zu erklären, hat die stationäre Phase feste Ionen wie Sulfat-Anionen oder quartäre Amin-Kationen. Jedes davon sollte mit einem Gegenion (einem Ion mit entgegengesetzter Ladung) assoziiert sein, wenn wir die Neutralität dieses Systems aufrechterh alten wollen. Wenn das Gegenion ein Kation ist, bezeichnen wir das System hier als Kationenaustauscherharz. Aber wenn das Gegenion ein Anion ist, ist das System ein Anionenaustauscherharz.
Es gibt fünf Hauptphasen in einem Ionenaustauschprozess;
- Anfangsphase
- Adsorption des Targets
- Beginn der Elution
- Elutionsende
- Regeneration
Was ist der Unterschied zwischen Affinitäts- und Ionenaustauschchromatographie?
Affinitätschromatographie ist eine biochemische Technik, die wir verwenden, um Komponenten in einer Mischung in Abhängigkeit von den Wechselwirkungen zwischen diesen Komponenten zu trennen, während die Ionenchromatographie eine Form der Flüssigkeitschromatographie ist, bei der wir ionische Substanzen analysieren können. Daher besteht der Hauptunterschied zwischen Affinitäts- und Ionenaustauschchromatographie darin, dass wir die Ionenaustauschchromatographie nur zur Trennung ionischer Substanzen verwenden können, während die Affinitätschromatographie in der Lage ist, sowohl geladene als auch ungeladene Partikel zu trennen. Hinsichtlich des Arbeitsprinzips besteht der Unterschied zwischen Affinitäts- und Ionenaustauschchromatographie darin, dass die Affinitätschromatographie darauf beruht, dass Zielmoleküle eine hohe Affinität zur stationären Phase aufweisen. Bei der Ionenaustauschchromatographie haben die Zielmoleküle jedoch eine entgegengesetzte Ladung zu der der Oberfläche der stationären Phase.
Die folgende Infografik zeigt den Unterschied zwischen Affinitäts- und Ionenaustauschchromatographie im direkten Vergleich.
Zusammenfassung – Affinitäts- vs. Ionenaustauschchromatographie
Zusammenfassend sind Affinitäts- und Ionenaustauschchromatographie zwei Formen von Flüssigchromatographietechniken. Der Hauptunterschied zwischen Affinitäts- und Ionenaustauschchromatographie besteht darin, dass wir Affinitätschromatographie verwenden können, um geladene oder ungeladene Komponenten in einem Gemisch zu trennen, während wir Ionenaustauschchromatographie verwenden können, um geladene Komponenten in einem Gemisch zu trennen.
