Hauptunterschied – HPLC vs. LCMS
Sehen wir uns zunächst die Bedeutung von HPLC und LCMS an, bevor wir den Unterschied zwischen HPLC und LCMS analysieren. Die Chromatographie ist eine Trenntechnik in der chemischen Analyse, bei der Probenbestandteile während des Durchgangs durch ein chromatographisches Medium getrennt werden. Es beinh altet auch die Wechselwirkung mit der Probe, der stationären Phase und der mobilen Phase. HPLC steht für High Performance Liquid Chromatography und wird als flüssigkeitschromatographisches Verfahren in der analytischen Chemie eingesetzt. Die Kombination aus Flüssigchromatographie und Massenspektroskopie (LCMS) wurde für die quantitative Analyse ausgewählter Biomoleküle entwickelt und ist im Vergleich zur HPLC ein hochempfindliches, genaues und spezifisches Assayverfahren. Dies ist der Hauptunterschied zwischen HPLC und LCMC. Dieser Artikel stellt Ihnen HPLC und LCMC vor, die sich mit chemischer Analyse befassen, und diskutiert die Unterschiede zwischen HPLC und LCMS.
Was ist HPLC?
Hochleistungsflüssigkeitschromatographie (HPLC) ist eine beliebte Trenntechnik in der analytischen Chemie. Es wird hauptsächlich verwendet, um die Komponenten zu trennen, um jede Komponente in einer Mischung zu identifizieren und zu quantifizieren. Früher war dieses Verfahren als Hochdruck-Flüssigkeitschromatographie bekannt, da es auf Pumpen angewiesen war, um ein unter Druck stehendes flüssiges Lösungsmittel, das die Probenmischung umfasste, durch eine mit einem festen Adsorptionsmaterial gepackte Säule fließen zu lassen. Jeder einzelne Bestandteil in der Probenmischung interagiert unterschiedlich mit dem festen Adsorptionsmaterial, was zu unterschiedlichen Durchflussraten für verschiedene Bestandteile führt. Dies kann zur Trennung der Bestandteile beim Ausströmen aus der HPLC-Säule führen.
HPLC wurde für verschiedene Anwendungen eingesetzt, wie z. B. die Analyse des Vitamin-D-Spiegels im Blut, den illegalen Drogenkonsum von Sportlern durch den Nachweis von Drogenrückständen in ihrem Urin, das Aussortieren der Bestandteile einer komplexen biologischen Probe für Forschungszwecke und Analysen und Herstellung von Arzneimitteln.
Was ist LCMS?
Flüssigchromatographie-Massenspektrometrie (LCMS) ist eine Analysetechnik, die die physikalischen Trennfähigkeiten der Flüssigchromatographie mit den Massenanalysefähigkeiten der Massenspektrometrie (MS) kombiniert. Flüssigkeitschromatographie ist eine Trenntechnik, und Massenspektrometrie wird verwendet, um das Masse-Ladungs-Verhältnis geladener Teilchen zu analysieren. Die physikalische Trennung wird normalerweise durch HPLC und alternativ LCMS, auch bekannt als HPLC-MS, erreicht. LCMS ist eine vorherrschende Analysetechnik, die im Vergleich zur HPLC eine sehr hohe Genauigkeit, Empfindlichkeit und Spezifität aufweist. Daher ist es in vielen Anwendungen wie Forschungszwecken, Arzneimittelanalyse, Lebensmittelanalyse usw. nützlich. LCMS wird hauptsächlich verwendet, um biochemische Eigenschaften einer bestimmten Probe in Gegenwart komplexer chemischer Mischungen zu trennen, zu erkennen, zu identifizieren und zu quantifizieren.
Was ist der Unterschied zwischen HPLC und LCMC?
Akronym und Definition von HPLC und LCMC
HPLC: HPLC steht für High-Performance Liquid Chromatography. Es ist eine Trenntechnik, die hauptsächlich verwendet wird, um die Komponenten zu trennen, um jede Komponente in einer Mischung zu identifizieren und zu quantifizieren.
LCMS: LCMS steht für Liquid Chromatography and Mass Spectrometry. Es ist eine Analysetechnik, die die physikalischen Trennfähigkeiten der Flüssigkeitschromatographie mit den Massenanalysefähigkeiten der Massenspektrometrie (MS) kombiniert.
Eigenschaften von HPLC und LCMC
Klassifizierung
HPLC: Dies ist nur eine Flüssigkeitschromatographie-Methode.
LCMS: Dies ist eine Kombination aus der Methode der Flüssigkeitschromatographie und der Massenspektrometrie.
Effizienz
HPLC: Im Vergleich zur LCMS ist die HPLC-Analyse weniger effizient und langsamer.
LCMS: Im Vergleich zur HPLC ist die LCMS-Analyse effizienter und schneller.
Empfindlichkeit
HPLC: Im Vergleich zur LCMS ist die HPLC-Analyse weniger empfindlich.
LCMS: Im Vergleich zur HPLC ist die LCMS-Analyse empfindlicher.
Spezifität
HPLC: Im Vergleich zur LCMS ist die HPLC-Analyse weniger spezifisch.
LCMS: Im Vergleich zur HPLC ist die LCMS-Analyse spezifischer.
Genauigkeit
HPLC: HPLC liefert bei der Bestimmung einiger Chemikalien weniger genaue Ergebnisse als LCMS.
LCMS: LCMS liefert bei der Bestimmung einiger Chemikalien genauere Ergebnisse als HPLC.
Komponente
HPLC: HPLC kann als Bestandteil der LCMS betrachtet werden.
LCMS: LCMS kann nicht als Bestandteil der HPLC betrachtet werden.
Ionenquelle
HPLC: Ionenquelle existiert nicht im HPLC-Gerät.
LCMS: Ionenquelle ist im LCMS-Instrument vorhanden.
Bewerbungen
HPLC: Ionen, Polymere, organische Moleküle und Biomoleküle können mit HPLC analysiert werden.
LCMS: Organische Moleküle und Biomoleküle können analysiert werden. Im Gegensatz zur HPLC können mit der LCMS unvollständig aufgelöste Mischungen untersucht werden.
Betrieb
HPLC: Das Diagramm eines HPLC-Instruments ist in Abbildung 1 dargestellt und umfasst normalerweise einen Autosampler, Pumpen und einen Detektor. Der Sampler führt die Probenmischung in die mobile Phase (unter Druck stehende Mischung von Lösungsmitteln wie Wasser, Acetonitril und/oder Methanol) ein, die sie auf die Säule überträgt. Die Pumpen liefern den gewünschten Fluss und die gewünschte Zusammensetzung der mobilen Phase durch die Säule. Die Säule ist mit dem Adsorbens gefüllt, bei dem es sich um ein körniges festes Teilchen wie Silica oder Polymere handelt. Der Detektor erzeugt ein Signal proportional zur Menge der in der Säule vorhandenen Probenbestandteile, wodurch eine quantifizierbare Analyse der ausgewählten Probenbestandteile ermöglicht wird. Das HPLC-Instrument wird gesteuert, und die Datenanalyse wird durch einen digitalen Mikroprozessor und eine Benutzersoftware bereitgestellt.
Abbildung 1: Diagramm des HPLC-Instruments
LCMS: Das Diagramm des LCMS-Instruments ist in Abbildung 2 dargestellt. Der Probenextrakt wird in die Säule eingeführt, die aus HPLC besteht. Diese Säule hält Proben-Metaboliten basierend auf physikalischen Merkmalen zurück, und verschiedene Metaboliten fließen in unterschiedlichen Zeitintervallen zum Massenspektrometer. Die Massenspektroskopie dient der Massenbestimmung von Teilchen, der Bestimmung der elementaren Anordnung eines Moleküls und der Aufklärung der Molekülstrukturen. Die Probe sollte jedoch ionisiert werden, um geladene Moleküle zu erzeugen, um ihre Masse-Ladungs-Verhältnisse zu bestimmen. Daher bestehen LCMS anstelle von HPLC-Instrumenten aus zusätzlichen drei Modulen wie einer Eisenquelle, einem Massenanalysator und einem Detektor. Eine Ionenquelle kann eine Gasphasenprobe in Ionen umwandeln, und ein Massenanalysator gruppiert die Ionen nach ihrer Masse unter Verwendung elektromagnetischer Felder. Schließlich quantifiziert ein Detektor die Werte und liefert Daten für jedes in der Probe vorhandene Ion. Die LCMS-Technik kann sowohl für qualitative als auch für quantitative Anwendungen verwendet werden.
Abbildung 2: Diagramm des LCMS-Instruments
Zusammenfassend ist HPLC eine Methode der Flüssigkeitschromatographie, während LCMS eine Kombination aus Flüssigkeitschromatographie und Massenspektrometrie ist. Diese beiden Analysetechniken haben unterschiedliche Eigenschaften, aber sie können verwendet werden, um Lebensmittelzusammensetzungen, Arzneimittel und andere bioaktive Moleküle zu identifizieren und zu quantifizieren.
