Hauptunterschied – Gelelektrophorese vs. SDS Seite
Gelelektrophorese ist eine Technik, die Makromoleküle in einem elektrischen Feld trennt. Es ist eine gängige Methode in der Molekularbiologie, DNA, RNA und Proteine aus Gemischen nach ihrer Molekülgröße zu trennen. SDS Page ist eine Art Gelelektrophorese, die verwendet wird, um Proteine aus einem Proteingemisch basierend auf ihrer Größe zu trennen. Gelelektrophorese ist ein Begriff, der verwendet wird, um sich auf die normale Technik zu beziehen, die für die DNA-, RNA- und Proteintrennung angewendet wird, während SDS Page eine Art von Gelelektrophorese ist. Dies ist der Hauptunterschied zwischen Gelelektrophorese und SDS-Seite.
Was ist Gelelektrophorese?
Gelelektrophorese ist eine gängige Technik, die in Laboratorien verwendet wird, um geladene Moleküle wie DNA, RNA, Proteine usw. von ihren Mischungen zu trennen. Bei der Gelelektrophorese wird ein Gel verwendet. Es wirkt wie ein Molekularsieb. Es gibt zwei Arten von Gelen, die in der Gelelektrophorese verwendet werden, nämlich Agarose und Polyacrylamid. Die Auswahl eines Gels und einer Gelzubereitung sind wichtige Faktoren, die bei Gelelektrophoresen zu berücksichtigen sind, da die Porengröße des Gels für eine gute Trennung von Molekülen durch Gelelektrophorese sorgfältig manipuliert werden sollte. Gelelektrophorese hat ein elektrisches Feld, das mit zwei Enden des Gels verbunden ist. Ein Ende des Gels ist positiv geladen, während das andere Ende negativ geladen ist.
DNA und RNA sind negativ geladene Moleküle. Sobald sie vom negativen Ende des Gels in das Gel geladen und an das elektrische Feld angelegt werden, wandern sie durch die Gelporen zum positiv geladenen Ende des Gels. Die Geschwindigkeit der Wanderung hängt von der Ladung und der Größe des Moleküls ab. Kleinere Moleküle wandern leichter durch die Gelporen als größere Moleküle. Daher legen kleinere Moleküle eine lange Strecke durch das Gel zurück und die größeren Moleküle eine kurze Strecke. Um die Wanderung von Molekülen auf dem Gel zu beobachten, werden spezielle Arten von Farbstoffen verwendet. Das elektrische Feld wird für eine bestimmte Zeitdauer angelegt und gestoppt, um den Verlust von Molekülen zu verhindern und die Moleküle an ihren zurückgelegten Positionen zu h alten. Im Gel sind verschiedene Banden zu erkennen. Diese Banden repräsentieren die Moleküle unterschiedlicher Größe. Daher ist die Gelelektrophorese nützlich, um Moleküle nach ihrer Größe zu unterscheiden.
Gelelektrophorese wird in verschiedene Techniken als präparative Technik in der Molekularbiologie wie PCR, RFLP, Klonierung, DNA-Sequenzierung, Southern Blotting, Genomkartierung usw. integriert.
Abbildung 01: Agarose-Gelelektrophorese
Was ist eine SDB-Seite?
Natriumdodecylsulfat-Polyacrylamid-Gelelektrophorese (SDS Page) ist eine Art Gelelektrophorese, die zur Trennung von Proteinen verwendet wird. Wenn Gelelektrophorese zur Trennung von Proteinen verwendet wird, sind spezielle Behandlungen erforderlich, da Proteine nicht wie DNA und RNA negativ geladen sind und nicht zum positiven oder negativen Ende wandern. Daher werden Proteine vor der Gelelektrophorese denaturiert und mit einer negativen Ladung beschichtet. Es wird mit einem Reinigungsmittel namens Natriumdodecylsulfat (SDS) durchgeführt. Die Gelelektrophorese, die SDS und ein Polyacrylamidgel als Trägermedium verwendet, ist als SDS Page bekannt. Diese Technik wird häufig in der Biochemie, Genetik, Forensik und Molekularbiologie verwendet.
Während der SDS-Page werden Proteine mit SDS gemischt. SDS entf altet Proteine in eine lineare Form und überzieht sie mit einer negativen Ladung, die proportional zu ihrer Molekülmasse ist. Aufgrund der negativen Ladung wandern Proteinmoleküle zum positiv geladenen Ende des Gels und trennen sich entsprechend ihrer Molekülmasse. In SDS Page wird Polyacrylamid als fester Träger für das Gel verwendet. Die tatsächliche Trennung der Proteine hängt hauptsächlich von den Eigenschaften des Gels ab. Daher sollte die Herstellung des Polyacrylamidgels sorgfältig erfolgen und die richtigen Konzentrationen von Polyacrylamid verwendet werden. Polyacrylamidgele zeigen eine höhere Auflösung als Agarosegele. Daher wird SDS Page als hochauflösende Technik zur Proteintrennung angesehen.
SDS Page ist eine Art denaturierende Gelelektrophorese. Es hat eine große Einschränkung bei der Proteinanalyse. Da SDS Proteine vor der Trennung denaturiert, erlaubt es nicht den Nachweis von enzymatischer Aktivität, Proteinbindungswechselwirkungen, Protein-Cofaktoren usw.
Abbildung 02: SDB-Seite
Was ist der Unterschied zwischen Gelelektrophorese und SDS-Seite?
Gelelektrophorese vs. SDS-Seite |
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| Gelelektrophorese ist eine Methode zur Trennung von Makromolekülen unter Verwendung eines elektrischen Feldes. | SDS Page ist eine hochauflösende Gelelektrophorese-Technik, die verwendet wird, um Proteine basierend auf ihrer Masse zu trennen. |
| Gel Run | |
| Es kann horizontal oder vertikal ausgeführt werden. | SDS-Seite läuft immer vertikal. |
| Trennungsgrund | |
| Die Trennung erfolgt nach Ladung und Größe. | Die Proteintrennung erfolgt nach Masse und Ladung. |
| Auflösung | |
| Agarose-Gelelektrophorese hat eine niedrige Auflösung und Polyacrylamid-Gelelektrophorese hat eine höhere Auflösung | SDS-Seite hat eine bessere Auflösung. |
| Denaturierung | |
| Gelelektrophorese umfasst sowohl denaturierende als auch nicht denaturierende Techniken. | SDS Page denaturiert Proteine vor der Trennung. |
Zusammenfassung – Gelelektrophorese vs. SDS Seite
Gelelektrophorese ist eine gängige Technik zur Trennung und Analyse von DNA, RNA und Proteinen auf der Grundlage ihrer Größe und Ladung. Es gibt zwei Hauptarten der Gelelektrophorese, nämlich die Agarose-Gelelektrophorese und die Polyacrylamid-Gelelektrophorese. Agarosegele werden hauptsächlich zur Nukleinsäuretrennung verwendet; Wenn eine höhere Auflösung erforderlich ist, werden Polyacrylamidgele verwendet. SDS Page ist eine Art der Gelelektrophorese, die üblicherweise zur Trennung komplexer Proteinmischungen verwendet wird. Es gilt als hochauflösende Proteintrenntechnik. Dies ist der Unterschied zwischen Gelelektrophorese und SDS-Seite.
