Hauptunterschied – HPLC vs. HPTLC
Der Hauptunterschied zwischen HPLC und HPTLC besteht darin, dass HPLC eine quantitative Trennung von Komponenten in einer Probe ermöglicht, während HPTLC keine quantitative Trennung von Komponenten in einer Probe ermöglicht.
Chromatographie ist eine physikalische Trennmethode, die verwendet wird, um die Komponenten in einem Gemisch zu trennen und zu identifizieren. Sowohl HPLC als auch HPTLC sind chromatographische Techniken. HPLC ist Hochleistungsflüssigkeitschromatographie. HPTLC ist Hochleistungs-Dünnschichtchromatographie.
Was ist HPLC?
HPLC ist Hochleistungsflüssigkeitschromatographie. Es handelt sich um eine Analysetechnik, die zum Trennen, Identifizieren und Quantifizieren von Komponenten in einem Gemisch verwendet wird. Bei dieser Technik wird die Probe in einem geeigneten Lösungsmittel gelöst. Dann wird das Lösungsmittel mit der Probe mit einem bestimmten Druck durch eine Pumpe geleitet. Die Pumpe ist mit festem Adsorptionsmaterial gefüllt. Dann binden einige Komponenten stark an das absorbierende Material, während andere Komponenten lose binden. Dies bewirkt, dass die Komponenten unterschiedliche Durchflussraten durch die Pumpe haben. Daher können die Komponenten leicht getrennt werden.
Abbildung 01: Ein HPLC-System
Das Adsorptionsmaterial, das die Pumpe füllt, wird als stationäre Phase bezeichnet. Das Lösungsmittel mit der gelösten Probe wird als mobile Phase bezeichnet. Die bei dieser Technik verwendete Pumpe wird als Säule bezeichnet. Die Säule ist mit einem Adsorptionsmaterial gefüllt, am häufigsten Silikapartikel. Die Größe dieser Teilchen kann im Bereich von 2–50 &mgr;m liegen. Der Trennprozess wird durch die Zusammensetzung der mobilen Phase und die Temperatur des Systems beeinflusst. Die Wechselwirkungen zwischen der stationären Phase und der Komponente in der Probe können hydrophobe Wechselwirkungen, Dipol-Dipol-Wechselwirkungen, ionische Bindungen usw. sein.
Der Betriebsdruck der HPLC ist erheblich höher als der der herkömmlichen Flüssigkeitschromatographie. Er liegt bei etwa 50-350 bar. Der Unterschied zwischen Flüssigkeitschromatographie und HPLC besteht darin, dass bei der Flüssigkeitschromatographie die Probe unter Schwerkraft durch die Säule fällt, während bei der HPLC die Probe durch die Säule unter Druck gesetzt wird. Die Größe der Säule und der absorbierenden Partikel sind im Vergleich zur herkömmlichen Flüssigchromatographie ebenfalls sehr klein. Die Auflösung der HPLC-Technik ist jedoch überlegen.
Was ist HPTLC?
HPTLC ist Hochleistungs-Dünnschichtchromatographie. Es ist die fortschrittliche und automatisierte Form der traditionellen TLC. Diese Technik bietet eine effiziente Auflösung in kurzer Zeit. Bei dieser Analysemethode können die Probe und eine Referenz gleichzeitig analysiert werden, wodurch die Probe mit der Referenz verglichen werden kann. Es bietet eine verbesserte analytische Genauigkeit als andere chromatographische Techniken. Der Zeitaufwand für die Analyse ist geringer. Die Technik ist eine kostengünstige Technik.
Abbildung 02: Eine Analyse von Lebensmittelfarbstoffen mittels HPTLC
Die HPTLC-Methode ist ein einfaches Verfahren, und der Probenvorbereitungsschritt entfällt ebenfalls (Bei der traditionellen DC ist der Probenvorbereitungsschritt vor der Trennung enth alten. Dieser Schritt beinh altet Reinigung und Anreicherung). Das Lösungsmittel kann direkt ohne Vorbehandlung verwendet werden, obwohl andere chromatographische Techniken Vorbehandlungen wie Entgasen, Filtrieren usw. erfordern.
Das in der HPTLC verwendete Adsorptionsmaterial ist Silica mit sehr kleinen Partikelgrößen. Bei herkömmlicher TLC beträgt die Partikelgröße von Kieselsäure 5–20 μm, während sie bei HPTLC 4–8 μm beträgt. Die Probe wird mit einem Applikator auf die HPTLC-Platte aufgetragen. Es ergibt eine gleichmäßige und sichere Anwendung. Dann werden die Platten in eine Kammer mit der mobilen Phase gegeben. Die Kammer sollte mit dem Dampf der mobilen Phase gesättigt sein. Nach dem HPTLC-Prozess können die sich bewegenden Flecken erkannt werden. Beim Nachweis der Flecken auf der Platte verwendet die HPTLC-Technik einen geeigneten UV-Bereich oder eine Jodkammer.
Was ist der Unterschied zwischen HPLC und HPTLC?
HPLC vs. HPTLC |
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| HPLC ist Hochleistungsflüssigkeitschromatographie. | HPTLC ist Hochleistungs-Dünnschichtchromatographie. |
| Technik | |
| Bei der HPLC wird die mobile Phase mit dem Lösungsmittel durch eine mit der stationären Phase gefüllte Säule geleitet. | Bei der HPTLC wird die Probe auf eine TLC-Platte getüpfelt und in eine Kammer gegeben, die die mobile Phase enthält; dann lässt man die Probe zusammen mit der mobilen Phase die Platte nach oben wandern. |
| Messung | |
| In der HPLC werden die Unterschiede zwischen den Flussraten der Komponenten durch die Säule verwendet, um die Komponenten in der Probe zu trennen. | Bei der HPTLC werden die Unterschiede zwischen den von jeder Komponente in der Probe zurückgelegten Entfernungen verwendet, um die Komponenten in der Probe zu trennen. |
| Quantitative Trennung | |
| HPLC ermöglicht die quantitative Trennung von Komponenten in einer Probe. | HPTLC erlaubt keine quantitative Trennung von Komponenten in einer Probe. |
Zusammenfassung – HPLC vs. HPTLC
HPLC und HPTLC sind zwei chromatographische Techniken. Der Hauptunterschied zwischen HPLC und HPTLC besteht darin, dass HPLC eine quantitative Trennung von Komponenten in einer Probe ermöglicht, während HPTLC keine quantitative Trennung von Komponenten in einer Probe ermöglicht.
