Der Hauptunterschied zwischen HPLC und UPLC besteht darin, dass die HPLC die Analyse von Partikeln mit einer Größe von etwa 5 Mikrometern ermöglicht, während UPLC viel kleinere Partikel von etwa 2 Mikrometern zulässt.
HPLC und UPLC sind beides flüssigkeitschromatographische Techniken, die bei der Trennung der Komponenten einer Verbindung nützlich sind. Um den Unterschied zwischen HPLC und UPLC zu kennen, müssen wir zuerst wissen, was HPLC ist. Dies liegt daran, dass UPLC eine spezielle Version von HPLC ist und wir es leicht verstehen können, wenn wir wissen, was HPLC ist.
Was ist HPLC?
Der Begriff HPLC steht für High Performance Liquid Chromatography. Es ist eine Technik, mit der wir verschiedene Bestandteile einer Verbindung trennen können. Außerdem ist es die am weitesten verbreitete Technik, um Komponenten einer Mischung zu identifizieren, zu quantifizieren und zu trennen. Außerdem verwendet diese Technik einen hohen Druck, um Lösungsmittel durch die Säule zu drücken. Darüber hinaus liegen die Hauptanwendungen der HPLC in der Biochemie zur Analyse von Bestandteilen einer Verbindung. Es ist eine ideale Methode zur Trennung und Identifizierung von Aminosäuren, Nukleinsäuren, Proteinen, Kohlenwasserstoffen, Pestiziden, Kohlenhydraten, Antibiotika, Steroiden und unzähligen anderen anorganischen Substanzen.
Abbildung 01: HPLC-System in einem Labor
Kurz gesagt ist die Arbeitsweise der HPLC-Technik wie folgt. Zunächst sollten wir die Probe in diskreten kleinen Mengen mit einer Pumpe in den Strom der mobilen Phase einbringen. Der Pumpendruck sollte bei 40 MPa geh alten werden. Dann perkoliert dieser Strom der mobilen Phase durch die HPLC-Säule. Außerdem passieren die Komponenten in der Probe die Säule. Ihre Bewegungsgeschwindigkeiten unterscheiden sich jedoch voneinander. Dieser Unterschied entsteht aufgrund der unterschiedlichen Wechselwirkungen zwischen den Probenkomponenten und dem Adsorptionsmittel innerhalb der Säule. Wir bezeichnen dieses Adsorbens als stationäre Phase, da es sich innerhalb der Säule befindet (sich nicht bewegt). Zweitens können wir am Ende der Säule die Probe sammeln, die aus der Säule eluiert. Dort können wir die Unterschiede in den Retentionszeiten für jede Komponente in der Probe bestimmen.
Was ist UPLC?
Der Begriff UPLC steht für Ultra High Performance Liquid Chromatography. Es ist eine Variation der HPLC, aber die Arbeitsweise ist die gleiche. Im Gegensatz zur HPLC ermöglicht diese Methode jedoch die Analyse sehr kleiner Partikel, z. B. 2 Mikrometer kleiner Partikel.
Abbildung 02: Ein UPLC-Gerät
Außerdem bietet es eine schnellere Analyse. Bei dieser Technik verwenden wir einen Pumpendruck von 100 MPa zum Einbringen der Probe in die Säule. Somit bestätigt dieser hohe Druck, dass die gesamte Probe in die Säule eingeführt wird. Daher ist dies im Vergleich zu HPLC sehr effizient.
Was ist der Unterschied zwischen HPLC und UPLC?
Der Begriff HPLC steht für High Performance Liquid Chromatography, während der Begriff UPLC für Ultra High Performance Liquid Chromatography steht. Daher ist die UPLC-Technik eine weiterentwickelte Version der HPLC. Somit ist die Arbeitsweise bei beiden Techniken gleich. Die UPLC ist jedoch im Vergleich zur HPLC effizienter, da sie einen hohen Pumpendruck verwendet; Der Pumpendruck für HPLC beträgt 40 MPa, während er für UPLC 100 MPa beträgt. Daher ist dies ein Unterschied zwischen HPLC und UPLC. Der Hauptunterschied zwischen HPLC und UPLC besteht vor allem darin, dass die HPLC die Analyse von Partikeln mit einer Größe von etwa 5 Mikrometern ermöglicht, während die UPLC viel kleinere Partikel von etwa 2 Mikrometern zulässt.
Zusammenfassung – HPLC vs. UPLC
UPLC ist eine Form der HPLC. Somit sind die Betriebsverfahren dieselben. Wir können jedoch einige verbesserte Funktionen in UPLC im Vergleich zu HPLC finden. Daher gibt es einen gewissen Unterschied zwischen HPLC und UPLC. Der Hauptunterschied zwischen HPLC und UPLC besteht jedoch darin, dass die HPLC die Analyse von Partikeln mit einer Größe von etwa 5 Mikrometern ermöglicht, während die UPLC viel kleinere Partikel von etwa 2 Mikrometern zulässt.
