Der Hauptunterschied zwischen isokratischer und Gradientenelution besteht darin, dass sich die isokratische Elution auf die Aufrechterh altung einer konstanten Konzentration in der mobilen Phase bezieht, während sich die Gradientenelution auf die Aufrechterh altung einer variierenden Konzentration in der mobilen Phase bezieht.
Die Begriffe isokratische Elution und Gradientenelution werden in der Chromatographie verwendet. Während eines chromatographischen Laufs verwenden wir eine stationäre Phase, die eine sich nicht bewegende Substanz ist, zusammen mit einer mobilen Phase, der sich bewegenden Substanz. Die isokratische und Gradientenelution beschreibt die Eigenschaften der mobilen Phase.
Was ist isokratische Elution?
Isokratische Elution ist ein Begriff, der in der Chromatographie verwendet wird, wenn die mobile Phase eine konstante Konzentration hat. Dabei ist die Konzentration der mobilen Phase während des gesamten chromatographischen Prozesses konstant. Dabei können wir im Chromatogramm beobachten, wie die Peakbreite mit der Retentionszeit linear zunimmt. Dies führt jedoch zu einem Nachteil – die spät eluierenden Peaks für die späte Elution werden sehr flach und breit. Daher sind diese breiten Peaks nur schwer als Peaks zu erkennen.
Außerdem ändert sich bei der isokratischen Elution die Selektivität nicht mit den Säulenabmessungen. Das bedeutet, dass die Selektivität nicht von Änderungen der Säulenabmessungen abhängt. Als Säulenabmessungen gelten hier Länge und Durchmesser. Daher eluieren die Peaks in der gleichen Reihenfolge.
Was ist Gradientenelution?
Gradientenelution ist ein Begriff aus der Chromatographie, wenn hier die mobile Phase eine unterschiedliche Konzentration aufweist. Mit anderen Worten muss die Konzentration der mobilen Phase nicht konstant bleiben. Bei der HPLC beispielsweise verwendet ein übliches Trennverfahren anfangs 10 % Methanol und endet bei 90 %, indem die Konzentration allmählich erhöht wird. Die mobile Phase besteht aus zwei Komponenten: einem schwachen Lösungsmittel und einem starken Lösungsmittel. Ein schwaches Lösungsmittel ermöglicht eine langsame Elution des gelösten Stoffes, während ein starkes Lösungsmittel die schnelle Elution des gelösten Stoffes bewirkt. Bei der Umkehrphasenchromatographie verwenden wir Wasser als schwaches Lösungsmittel und organisches Lösungsmittel als starkes Lösungsmittel.
Abbildung 01: HPLC
Außerdem verringert die Gradientenelutionsmethode die später eluierenden Komponenten, um sie schneller eluieren zu lassen, was einen schmalen Peak im Chromatogramm ergibt. Dieses Verfahren verbessert auch die Peakform und die Peakhöhe. Darüber hinaus ändert sich bei der Gradientenelutionstechnik die Elutionsreihenfolge mit den Änderungen der Säulenabmessungen.
Was ist der Unterschied zwischen isokratischer und Gradientenelution?
Die Begriffe isokratische Elution und Gradientenelution werden in der Chromatographie verwendet. Isokratische und Gradientenelution beschreiben die Eigenschaften der mobilen Phase. Der Hauptunterschied zwischen isokratischer und Gradientenelution besteht darin, dass sich die isokratische Elution auf die Aufrechterh altung einer konstanten Konzentration in der mobilen Phase bezieht, während sich die Gradientenelution auf die Aufrechterh altung einer variierenden Konzentration in der mobilen Phase bezieht.
Bei der isokratischen Elutionstechnik nimmt die Peakbreite linear mit der Retentionszeit zu. Bei der Gradientenelutionstechnik wird jedoch die Retention der später eluierenden Komponenten verringert, so dass die Elution schneller wird und schmale Peaks ergibt. Abgesehen davon hängt bei der isokratischen Elution die Selektivität nicht von den Säulenabmessungen ab, aber bei der Gradientenelution ändert sich die Selektivität mit wechselnden Säulenabmessungen.
Die folgende Tabelle fasst den Unterschied zwischen isokratischer und Gradientenelution zusammen.
Zusammenfassung – Isokratische vs. Gradientenelution
Isokratische Elution und Gradientenelution beschreiben die Eigenschaften der mobilen Phase. Der Hauptunterschied zwischen isokratischer und Gradientenelution besteht darin, dass sich die isokratische Elution auf die Aufrechterh altung einer konstanten Konzentration in der mobilen Phase bezieht, während sich die Gradientenelution auf die Aufrechterh altung einer variierenden Konzentration in der mobilen Phase bezieht.
