Hauptunterschied – primärer vs. sekundärer Antikörper
Antikörper sind Y-förmige Proteine oder Immunglobuline, die von Plasmazellen produziert werden. Antikörper haben die Fähigkeit, Antigene, also Fremdmoleküle wie Krankheitserreger, Toxine usw., zu identifizieren und die von ihnen ausgehende Bedrohung erfolgreich zu neutralisieren. Die Antikörperstruktur besteht aus einem Teil, der als Paratop bekannt ist (Antigenbindungsstelle an der Spitze der „Y“-förmigen Struktur), um die komplementäre Struktur des Antigens, das als Epitop bekannt ist, zu identifizieren und daran zu binden. Paratop und Epitop funktionieren als „Schloss“bzw. „Schlüssel“. Dies ermöglicht die richtige Bindung des Antigens an den Antikörper. Die Wirkung des Antigens ist direkt proportional zur Art des Antigens. Sobald ein Antikörper an ein Antigen gebunden ist, aktiviert er andere Immunantworten wie die Aktion von Makrophagen, um den fremden Krankheitserreger zu zerstören. Zur Aktivierung kommuniziert ein Antikörper mit den anderen Komponenten des Immunsystems über die Fc-Region, die sich in der Basis der „Y“-förmigen Struktur des Antikörpers befindet. Es gibt fünf verschiedene Arten von Antikörpern: IgM, IgG, IgA, IgD und IgE. Entsprechend dem Bindungsmechanismus eines Antikörpers an ein Antigen (direkt oder indirekt) gibt es zwei Arten von Antikörpern, die als primärer Antikörper und sekundärer Antikörper bekannt sind. Der primäre Antikörper hat die Fähigkeit, direkt an das Antigen zu binden, während ein sekundärer Antikörper nicht direkt an das Antigen bindet, sondern durch die Bindung an einen primären Antikörper interagiert. Dies ist der Hauptunterschied zwischen primärem und sekundärem Antikörper.
Was ist ein Primärantikörper?
Ein primärer Antikörper kann als ein Immunglobulin definiert werden, das spezifisch an Proteine bindet. Es ist der Antikörper, der direkt an das Antigen bindet. Dies wird durch die Erkennung eines auf dem Antigen vorhandenen Epitops durch die variable Region des primären Antikörpers erreicht. Sie werden als polyklonale und monoklonale Antikörper entwickelt. Diese Antikörper sind für Forschungszwecke nützlich, um Biomarker für Krankheiten wie Diabetes, Krebs, Alzheimer und Parkinson nachzuweisen. Im primären Antikörper ist kein Fluorophor oder Enzym vorhanden.
Abbildung 01: Primärer Antikörper
Damit der Forscher das Antigen sichtbar machen kann, sollte es mit weiteren Reagenzien wie sekundären Antikörpern kombiniert werden. Es ist auch wichtig, Absorption, Verteilung, Metabolismus und Ausscheidung (ADME) und Multi-Drug-Resistenz (MDR) mehrerer Therapeutika zu untersuchen. Primärantikörper liegen in verschiedenen Formen vor, die von rohem Antiserum bis zu Antigen-gereinigten Präparaten reichen; dementsprechend werden sie produziert und geliefert. Kommerziell erhältliche Primärantikörper sind normalerweise Biotin-markiert oder fluoreszenzmarkiert.
Was ist ein sekundärer Antikörper?
Sekundäre Antikörper werden an die schweren Ketten der primären Antikörper gebunden, um den Nachweis, die Sortierung und die Reinigung von Zielantigenen zu unterstützen. Sekundärantikörper stören den Bindungsvorgang der Primärantikörper mit den Antigenen nicht. Es bindet nicht direkt an das Antigen. Sobald die primären Antikörper direkt an die Zielantigene gebunden sind, kommen sekundäre Antikörper und binden an die primären Antikörper. Der sekundäre Antikörper sollte während des Antigen-Nachweiszwecks für die Antikörperspezies und das Isotop des primären Antikörpers spezifisch sein. Der Typ des sekundären Antikörpers wird durch die Klasse des primären Antikörpers, den Ausgangswirt und die bevorzugte Markierung ausgewählt. Die meisten primären Antikörperklassen gehören zur IgG-Klasse.
Abbildung 02: Sekundärer Antikörper
Für Forschungszwecke werden Sekundärantikörper in verschiedenen Arten von Assays wie ELISA oder Western Blotting, Durchflusszytometrie und Immunhistochemie usw. verwendet.
Was sind die Ähnlichkeiten zwischen primärem und sekundärem Antikörper?
- Primäre und sekundäre Antikörper sind an Immunantworten beteiligt.
- Beide haben die typische Struktur eines Antikörpers gemeinsam.
Was ist der Unterschied zwischen primärem und sekundärem Antikörper?
Primärer vs. sekundärer Antikörper |
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| Primärer Antikörper ist ein Immunglobulin, das spezifisch an ein bestimmtes Protein oder ein anderes Biomolekül von Forschungsinteresse bindet, um es zu reinigen oder nachzuweisen und zu messen. | Sekundärer Antikörper ist eine Art von Antikörper, der durch die Bindung mit primären Antikörpern indirekt an Antigene bindet, um den Nachweis, die Sortierung und die Reinigung von Zielantigenen zu unterstützen. |
| Wechselwirkungen mit Antigen | |
| Primäre Antikörper binden direkt an das Antigen. | Sekundärer Antikörper bindet nicht direkt an das Antigen, sondern interagiert durch die Bindung mit dem primären Antikörper. |
| Funktion | |
| Primäre Antikörper werden als Biomarker zum Nachweis von Krankheiten wie Krebs, Diabetes, Alzheimer, Parkinson usw. verwendet. | Sekundärantikörper werden bei der Immunmarkierung verwendet. |
Zusammenfassung – Primärer vs. sekundärer Antikörper
Antikörper sind Immunglobuline, die eine wichtige Rolle im Immunsystem spielen. Sie haben eine Y-förmige Struktur und identifizieren Fremdstoffe; Antigene, um das Vorhandensein pathogener Organismen nachzuweisen und sie erfolgreich zu eliminieren, ohne dass die Pathogene dem Wirtsorganismus Schaden zufügen. Es gibt fünf verschiedene Arten von Antikörpern; IgM, IgG, IgA, IgD und IgE und entsprechend der Art der Bindung eines Antikörpers an ein Antigen (direkt oder indirekt) gibt es zwei Arten von Antikörpern; primärer Antikörper und sekundärer Antikörper. Primäre Antikörper haben die Fähigkeit, direkt an das Antigen zu binden, während ein sekundärer Antikörper nicht direkt an das Antigen bindet, sondern durch Bindung an den primären Antikörper Wechselwirkungen bildet. Dies ist der Unterschied zwischen primärem und sekundärem Antikörper.
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