Hauptunterschied – Gramfärbung vs. Kultur
Gram-Färbung ist eine Färbetechnik, die durchgeführt wird, um Bakterien gemäß der Dicke der Peptidoglykanschicht in ihrer Zellwand in zwei Gruppen zu differenzieren. Kultur ist eine Methode zur Züchtung und Erh altung von Mikroorganismen unter Laborbedingungen für verschiedene Analysen. Der Hauptunterschied zwischen Grammfärbung und Kultur ist ihre Funktion; Gram-Stamm eine Färbetechnik für Bakterien, bei der die Kultur eine Methode zur Züchtung und Erh altung von Mikroorganismen ist.
Was ist Gramfärbung?
Gram-Färbung ist eine wichtige differenzielle Färbetechnik, die zur Identifizierung von Bakterien in der Mikrobiologie verwendet wird. Diese Technik wurde 1884 vom dänischen Bakteriologen Hans Christian Gram eingeführt. Die Gramfärbung kategorisiert Bakterien in zwei Hauptgruppen: grampositive und gramnegative; diese sind sehr wichtig bei der bakteriellen Klassifizierung und Identifizierung. Die Gram-Färbung wird als erster Schritt zur bakteriellen Charakterisierung durchgeführt.
Bakterien werden basierend auf den Unterschieden in ihrer Zellwand gruppiert. Grampositive Bakterien enth alten eine dicke Peptidoglycanschicht in ihrer Zellwand, während gramnegative Bakterien eine dünne Peptidoglycanschicht in ihrer Zellwand enth alten, wie in Abbildung 01 gezeigt. Das Ergebnis der Gram-Färbung basiert auf dem Dickenunterschied in der Peptidoglycanschicht der Zellwand.
Abbildung 1: Grampositive Bakterien und gramnegative Bakterien
Grams-Färbung wird mit vier verschiedenen Reagenzien durchgeführt, nämlich; Primärbeize, Beize, Entfärbungsmittel und Gegenbeize. Kristallviolett und Safranin dienen als Primär- bzw. Gegenfärbemittel, während das Gramm Jod und der 95-prozentige Alkohol als Beizmittel bzw. Entfärber dienen.
Grundlegende Schritte der Gram-Färbung
- Ein Bakterienausstrich wird auf einem sauberen Glasobjektträger präpariert, hitzefixiert und gekühlt.
- Abstrich wird für 1 – 2 Minuten mit Kristallviolett überflutet.
- Ausstrich wird mit langsam fließendem Leitungswasser abgespült, um überschüssige Flecken zu entfernen.
- Gramm Jod wird 1 Minute lang auf den Abstrich aufgetragen.
- Abstrich wird mit langsam fließendem Leitungswasser gespült
- Smear wird mit 95%igem Alkohol für 2 – 5 Sekunden gewaschen und mit langsam fließendem Leitungswasser abgespült.
- Ausstrich wird 1 Minute lang mit Safranin gegengefärbt
- Ausstrich wird mit langsam fließendem Leitungswasser abgespült, getrocknet und unter dem Mikroskop betrachtet.
Am Ende der Gram-Färbung werden gramnegative Bakterien in rosa Farbe beobachtet, während die grampositiven Bakterien in violetter Farbe beobachtet werden, wie in Abbildung 02 gezeigt. Das Ergebnis der Gram-Färbung wird durch die Dicke bestimmt der Peptidoglykanschicht in ihrer Zellwand. Während des Entfärbungsschritts werden der Primärfarbstoff und das Beizmittel leicht von den gramnegativen Bakterien entfernt und werden farblos, da sie eine dünne Peptidoglykanschicht aufweisen. Die primäre Färbung wird in den grampositiven Bakterien zurückgeh alten, da sie eine dicke Peptidoglykanschicht haben. Die Gegenfärbung ist für grampositive Bakterien aufgrund der Retention der Primärfärbung nicht wirksam. Gram-positive Bakterien sind also in der primären Färbefarbe sichtbar, d. h. in violetter Farbe. Die Gegenfärbung färbt die gramnegativen Bakterien und wird in der Pick-Farbe sichtbar, die die Safranin-Farbe ist. Daher ist es einfach, Bakterien durch die Gram-Färbung in zwei Gruppen zu kategorisieren, und sie ist wertvoll bei der bakteriellen Differenzierung und Identifizierung.
Abbildung 2: Gram-Stamm
Was ist Kultur?
Mikrobenkultur ist eine Methode zur Kultivierung und H altung von Mikroorganismen unter Laborbedingungen für verschiedene Zwecke. Kulturen werden in festen, halbfesten und flüssigen Medien gezüchtet, basierend auf der Art und dem Zweck der Mikroorganismenkultivierung. Kulturen werden mit notwendigen Nährstoffen und Wachstumsbedingungen versorgt, die von den Mikroorganismen benötigt werden. Es gibt verschiedene Komponenten eines Kulturmediums wie Energiequelle, Kohlenstoffquelle, Stickstoffquelle, Mineralien, Mikronährstoffe, Wasser, Verfestigungsmittel usw. Optimale Temperatur, Sauerstoff und pH-Wert sollten entsprechend der Art des gezüchteten Mikroorganismus eingestellt werden.
Es gibt verschiedene Arten von mikrobiellen Kulturen; zum Beispiel Chargenkultur, kontinuierliche Kultur, Stichkultur, Agarplattenkultur, Brühenkultur usw. Je nach Zusammensetzung des Wachstumsmediums gibt es verschiedene Arten von Kulturmedien, die als synthetische Medien, halbsynthetische Medien und natürliche Medien bekannt sind. Mikrobielle Kulturen werden unter sterilen Bedingungen in einer speziellen Kammer namens Laminar Air Flow hergestellt. Das Wachstumsmedium und die Glaswaren werden vor der Inokulation mit dem gewünschten Mikroorganismus sterilisiert. Unter geeigneten sterilen Bedingungen wird der Zielmikroorganismus in das sterilisierte Nährmedium überführt und bei optimaler Temperatur inkubiert. Innerhalb des Mediums wachsen und vermehren sich Mikroorganismen unter Verwendung der bereitgestellten Nährstoffe.
Abbildung 3: Eine Bakterienkultur auf einer Platte
Was ist der Unterschied zwischen Gram-Färbung und Kultur?
Grammfleck gegen Kultur |
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| Grams-Stamm ist eine differentielle Färbetechnik, die zur bakteriellen Differenzierung und Identifizierung verwendet wird. | Mikrobenkultur ist eine Methode zur Züchtung von Mikroorganismen im Labor. |
| Komponenten | |
| Hierbei werden verschiedene Reagenzien verwendet, darunter zwei Farbstoffe. | Hierbei werden verschiedene Kulturmedien wie feste, halbfeste und flüssige Medien verwendet, die aus Nährstoffen und anderen notwendigen Bedingungen bestehen. |
| Grundfunktionen | |
| Dies ermöglicht die Gruppierung von Bakterien in zwei Gruppen: gramnegative und grampositive. | Dies ermöglicht die Vermehrung von Mikroorganismen für verschiedene Zwecke. |
| Basis | |
| Das Ergebnis der Gramfärbung basiert auf den Unterschieden in der Peptidoglykanschicht der Zellwand. | Mikroorganismen wachsen und vermehren sich im Kulturmedium. |
| Ergebnis | |
| Gramnegative Bakterien sind in rosa Farbe sichtbar und grampositive Bakterien sind in violetter Farbe sichtbar. | Auf den Platten sind Kolonien der Mikroorganismen zu sehen. Auf flüssigen Medien liegen Mikroorganismen in suspendierter Form vor. |
Zusammenfassung – Gramfärbung vs. Kultur
Mikrobielle Kulturen werden unter Laborbedingungen für verschiedene Zwecke wie Lagerung, Tests, chemische Reinigung usw. hergestellt und gepflegt. Die Gram-Färbung ist ein Färbeverfahren, das Bakterien in zwei Hauptgruppen unterscheidet, die als gramnegative Bakterien und grampositive Bakterien bezeichnet werden. Daher besteht der Unterschied zwischen der Gramm-Färbung und der Kultur darin, dass die Gramm-Färbung eine Färbetechnik für Bakterien ist, während die Kultur eine Methode zur Züchtung und Erh altung von Mikroorganismen in den Labors ist.
