Der Hauptunterschied zwischen EcoRI- und HindIII-Restriktionsenzymen besteht darin, dass EcoRI ein aus E. coli isoliertes Typ-II-Restriktionsenzym ist, während HindIII ein aus Haemophilus influenza isoliertes Typ-II-Restriktionsenzym ist.
Restriktionsenzym oder Restriktionsendonuclease ist ein Enzym, das DNA an bestimmten Erkennungsstellen (Restriktionsstellen) innerhalb des DNA-Moleküls in Fragmente sp altet. Diese Restriktionsenzyme kommen in Bakterien und Archaeen vor. Sie bieten einen Abwehrmechanismus gegen eindringende Viren. Restriktionsenzyme werden im Allgemeinen in fünf verschiedene Typen eingeteilt: Typ I, Typ II, Typ III, IV und Typ V. EcoRI und HindIII sind zwei Restriktionsenzyme, die zur Gruppe der Restriktionsenzyme vom Typ II gehören.
Was sind EcoRI-Restriktionsenzyme?
EcoRI ist ein Typ-II-Restriktionsenzym, das aus E.coli-Spezies isoliert wird. Es ist ein Restriktionsenzym, das DNA-Doppelhelices an bestimmten Stellen in Fragmente sp altet. EcoRI ist auch Teil des Restriktions-Modifikationssystems. EcoRI war das erste Enzym, das ursprünglich aus dem RY13-Stamm der E. coli-Spezies isoliert wurde. Es wird als Restriktionsenzym in der Molekularbiologie verwendet. EcoRI erzeugt klebrige Enden aus 4 Nukleotiden mit 5'-Endüberhängen von AATT. EcoRI schneidet die DNA an der spezifischen Erkennungssequenz G↓AATTC. Es hat die palindromische komplementäre Sequenz von CTTAA↓G. Darüber hinaus gehört dieses Restriktionsenzym zur Unterklasse Typ II P (palindromische Spezifität). In seiner Primärstruktur enthält EcoRI das PD. D/EXK-Motiv in seinem aktiven Zentrum, wie viele andere Restriktionsenzyme.
Abbildung 01: EcoRI
EcoRI-Restriktionsenzym ist ein Homodimer von 31 kDa. Es enthält eine globuläre Domäne der α/β-Architektur. Jede Untereinheit enthält eine Schleife, die aus der kugelförmigen Domäne herausragt und sich beim Binden um die DNA wickelt. Dieses Enzym kann zusammen mit der Sequenz, die es normalerweise schneidet, cokristallisiert werden. Darüber hinaus wird das EcoRI-Restriktionsenzym in einer Vielzahl von molekulargenetischen Techniken verwendet, darunter Klonierung, DNA-Screening und Deletionsabschnitte von DNA unter In-vitro-Bedingungen.
Was sind HindIII-Restriktionsenzyme?
HindIII ist ein Typ-II-Restriktionsenzym, das aus Haemophilus-influenza-Spezies isoliert wird. Es sp altet die palindromische DNA-Sequenz AACCTT in Gegenwart des Cofaktors Mg2+ durch Hydrolyse. Die Sp altung dieser speziellen Sequenz zwischen den AA’s (5’A↓ACCTT3’ und 3’TTCGA↓A5’) führt zu 5’-Überhängen am DNA-Molekül, die als klebrige Enden bezeichnet werden. Dieses Enzym kommt in prokaryotischen Organismen wie Bakterien vor. Bakterien nutzen dieses Enzym als Abwehrmechanismus gegen Viren wie Bakteriophagen.
Abbildung 02: HindIII
Strukturell ist HindIII ein Homodimer. Es enthält einen gemeinsamen strukturellen Kern, der vier β-F altblätter und eine einzelne α-Helices umfasst, wie andere Typen von II-Restriktionsenzymen. Die Molekülmasse dieses Enzyms beträgt 34,9 kDa. Darüber hinaus ist HindIII sehr nützlich in modernen molekularbiologischen Experimenten wie DNA-Sequenzierung und Kartierung.
Was sind die Ähnlichkeiten zwischen EcoRI- und HindIII-Restriktionsenzymen?
- EcoRI und HindIII sind zwei Restriktionsenzyme, die zur Gruppe der Restriktionsenzyme vom Typ II gehören.
- EcoRI und HindIII wurden in den frühen 1970er Jahren gefunden.
- EcoRI und HindIII enth alten beide das PD.. D/EXK-Aminosäuresequenzmotiv.
- Beide Restriktionsenzyme führen eine sehr spezifische Sp altung der DNA durch.
- Diese Restriktionsenzyme benötigen Mg2+ als Cofaktor für ihre spezifische Aktivität.
- Sie produzieren nach dem Schneiden von DNA klebrige Enden.
- Sie sind sehr nützliche Komponenten in der modernen molekularbiologischen Forschung.
Was ist der Unterschied zwischen EcoRI- und HindIII-Restriktionsenzymen?
EcoRI ist ein Typ-II-Restriktionsenzym, das aus E.coli-Spezies isoliert wird, während HindIII ein Typ-II-Restriktionsenzym ist, das aus Haemophilus-influenza-Spezies isoliert wird. Dies ist also der Hauptunterschied zwischen EcoRI und HindIII. Darüber hinaus schneidet EcoRI die DNA an der spezifischen Erkennungssequenz G↓AATTC, während HindIII die DNA an der spezifischen Erkennungssequenz A↓ACCTT schneidet.
Die folgende Infografik zeigt die Unterschiede zwischen EcoRI und HindIII in tabellarischer Form zum direkten Vergleich.
Zusammenfassung – EcoRI vs. HindIII-Restriktionsenzyme
EcoRI und HindIII sind zwei Restriktionsenzyme, die zur Unterklasse Typ II p gehören. Sie führen eine sehr spezifische Sp altung der DNA durch. EcoRI ist ein Restriktionsenzym vom Typ II, das aus E. coli-Arten isoliert wird, während HindIII ein Restriktionsenzym vom Typ II ist, das aus Haemophilus influenza-Arten isoliert wird. Das fasst also den Unterschied zwischen EcoRI und HindIII zusammen.
