Hauptunterschied – CFU vs. MPN
Colony Forming Unit (CFU) und Most Probable Number (MPN) sind zwei Methoden zur Zählung von Mikroorganismen in Proben. Beide Parameter dienen zum Nachweis der Wasserqualität und von fäkalen Indikatorbakterien in Wasserproben. Die koloniebildende Einheit ist ein Maß, das verwendet wird, um die Anzahl lebensfähiger Bakterienzellen oder Pilzzellen in einem bestimmten Volumen oder Gewicht einer gegebenen Probe zu zählen. Die Standardeinheit für diesen Parameter ist CFU/ml oder CFU/g. Wahrscheinlichste Zahl ist eine andere Einheit, die verwendet wird, um die Anzahl lebensfähiger Bakterienzellen in einer flüssigen Probe zu messen. Der Hauptunterschied zwischen CFU und MPN besteht darin, dass CFU aus den Bakterien- und Pilzkolonien berechnet wird, die auf einer festen Agarplatte wachsen, während MPN aus lebensfähigen Bakterien berechnet wird, die in einem flüssigen Medium wachsen.
Was ist CFU?
Colony Forming Unit (CFU) ist ein Parameter, der die Anzahl lebensfähiger Bakterien- oder Pilzzellen in einer bestimmten Probe misst. Die Methode, bei der koloniebildende Einheiten gezählt werden, wird als Standard-Plattenzählung bezeichnet. Die lebensfähigen Kolonien, die auf den Agarplatten erscheinen, werden als KBE pro 1 ml (koloniebildende Einheit pro Milliliter) der Probe für Flüssigkeiten oder als KBE pro 1 g (koloniebildende Einheit pro Gramm) der Probe für Feststoffe ausgedrückt.
Es gibt zwei gebräuchliche Methoden zur Messung der CFU in einer Probe. Sie sind die Spread-Plate-Methode und die Pour-Plate-Methode. Diese beiden Methoden werden durch eine Technik unterstützt, die als Reihenverdünnung bezeichnet wird. Reihenverdünnte Proben ermöglichen das Erh alten einer zählbaren Anzahl von Kolonien auf der Agaroberfläche. Ein bekanntes Probenvolumen kann auf der Oberfläche einer Agarplatte verteilt oder mit Agar gemischt und auf eine Platte gegossen werden. Anschließend wird die Platte inkubiert und die entstehenden Kolonien gezählt. Die Koloniezahl bezieht sich auf die Anzahl der Mikroorganismen in der Originalprobe. Die Platten, die zu viele Kolonien oder zu wenige Kolonien zeigen, werden von der Zählung ausgeschlossen, da die Ergebnisse auf diesen Platten möglicherweise nicht statistisch korrekt sind. Statistisch gesehen liegt der beste Bereich bei 30 – 300 Kolonien auf einer Agarplatte. Daher sollten die richtigen Platten für eine genaue Zählung ausgewählt werden. Für die obige Funktion wird eine Reihenverdünnung durchgeführt.
Sobald Sie die Anzahl der lebensfähigen Kolonien auf den Platten gezählt haben, kann CFU/ml mit der folgenden Gleichung berechnet werden.
KBE pro ml Originalprobe=Anzahl Kolonien auf einer Platte X Verdünnungsfaktor
Verdünnungsfaktor=(1/ Verdünnung der Platte)
Wenn Sie beispielsweise 149 Kolonien auf der Platte der 10-4-Verdünnung erh alten, dann kann die Anzahl der Bakterien in 1 ml der Originalprobe wie folgt berechnet werden:
KBE/ml=(149) x (1/10-4)
=149 × 104 oder 1490000
=1. 49 x 106
Abbildung 01: Koloniebildende Einheit
Was ist MPN?
Die wahrscheinlichste Zahl ist ein alternatives Maß zu CFU/ml. MPN schätzt auch die lebensfähigen Zellen in einer flüssigen Probe. Es zählt Organismen, die in einer Flüssigkultur wachsen, und ist eine überwiegend bakteriologische Technik. Dieses Verfahren ist besonders nützlich für Proben, die geringe Konzentrationen an Bakterienzellen enth alten; B. Milch, Trinkwasser usw. Der MPN-Wert wird für 100 ml Volumen ausgedrückt. MPN stützt sich auf eine statistische Methode, die auf der Wahrscheinlichkeitstheorie basiert. Es gibt statistische Tabellen, die entwickelt wurden, um MPN-Werte pro 100 ml der Probe zu finden. Diese Tabellen zeigen die Ergebnisse bei 95 % Konfidenzgrenzen.
Der MPN-Wert wird nach Durchführung einer Technik berechnet, die als Mehrfachröhrchen-Fermentationsverfahren bezeichnet wird. Drei Sätze von Röhrchen, die ein geeignetes Kulturmedium enth alten, werden mit drei verschiedenen Volumina der Probe inokuliert, z. B. 10 ml, 1 ml und 0.1 ml und für das Wachstum inkubiert. Nach der Inkubationszeit werden die Röhrchen mit + (positiv) oder – (negativ) für das Vorhandensein oder Nichtvorhandensein von Wachstum bewertet. Das Muster positiver und negativer Ergebnisse wird dann mit einer MPN-Tabelle statistischer Wahrscheinlichkeiten verglichen, um die Anzahl der Mikroorganismen abzuschätzen. Dann wird der MPN-Wert für 100 ml der Probe angegeben. MPN wird häufig verwendet, um coliforme Bakterien in Wasserproben nachzuweisen.
Abbildung 02: MPN-Tabelle
Was ist der Unterschied zwischen CFU und MPN?
CFU vs. MPN |
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| CFU ist ein Maß, das verwendet wird, um die Anzahl lebensfähiger Bakterien- oder Pilzkolonien in einer bestimmten Probe auszudrücken. | MPN ist ein alternatives Maß für CFU und misst die Anzahl lebensfähiger Bakterienzellen in einer flüssigen Probe. |
| Einheit | |
| KBE/ml oder KBE/g | MPN/100 ml |
| Berechnung | |
| CFU wird berechnet, indem die Anzahl der auf Agarplatten gewachsenen Kolonien gezählt wird. | MPN wird berechnet, indem positive und negative Muster der Röhrchen mit der MPN-Statistiktabelle verglichen werden. |
| Reihenverdünnungstechnik | |
| Reihenverdünnung wird durchgeführt, bevor die Proben auf Agarplatten gegeben werden. | Reihenverdünnung wird normalerweise nicht durchgeführt, wenn MPN berechnet wird |
| Methoden | |
| Spread-Plate-Methode und Pour-Plate-Methode sind zwei Methoden zur Gewinnung von CFU. | Mehrfachröhrchenfermentation ist die Methode, die durchgeführt wird, um den MPN-Wert zu erh alten. |
Zusammenfassung – CFU vs. MPN
Die Messung des mikrobiellen Wachstums ist aus vielen Gründen erforderlich. In lebensmittelverarbeitenden Betrieben ist es notwendig, den Geh alt und die Art von Mikroorganismen in Lebensmitteln zu messen. In der Lebensmittelindustrie und Medizin muss sichergestellt werden, dass Sterilisationsbehandlungen effektiv angewendet werden. In Kläranlagen ist eine regelmäßige Keimzahlbestimmung vorgeschrieben. Bei der Optimierung von Verfahren in der Molekularbiologie ist es erforderlich, die Anzahl der Kolonien auf Platten zu messen. Daher stehen verschiedene Zähl- und Wachstumsmessverfahren zur Verfügung. CFU und MPN sind zwei solche Methoden, die in verschiedenen Bereichen weit verbreitet sind. CFU ist ein Maß für die Anzahl lebensfähiger Bakterien- und Pilzkolonien, die in einer gegebenen Probe vorhanden sind. Sie wird mit der Standard-Plattenzählmethode oder der lebensfähigen Plattenzählmethode berechnet. MPN ist ein weiteres Maß, das die Anzahl der Bakterienzellen ausdrückt, die in einem gegebenen Volumen der flüssigen Probe vorhanden sind. Er wird unter Verwendung des Mehrrohrfermentationsverfahrens und der MPN-Tabelle berechnet. Dies ist der Unterschied zwischen CFU und MPN.
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