Der Hauptunterschied zwischen Immunpräzipitation und Koimmunpräzipitation besteht darin, dass die Immunpräzipitation eine Technik ist, die ein Protein mit einem spezifischen Antikörper aus der Lösung präzipitiert, während die Koimmunpräzipitation eine Technik ist, die intakte Proteinkomplexe mit einem spezifischen Antikörper aus der Lösung präzipitiert.
Antigen-Antikörper-Wechselwirkung ist eine spezifische chemische Wechselwirkung zwischen Antikörpern, die von B-Zellen produziert werden, und Antigenen (Proteinen) während einer Immunreaktion. Normalerweise verbinden sich lösliche Antigene mit löslichen Antikörpern in Gegenwart eines Elektrolyten bei löslicher Temperatur und pH, um einen unlöslichen sichtbaren Komplex zu bilden. Dies wird als Fällungsreaktion bezeichnet. Daher sind Immunpräzipitation und Coimmunpräzipitation zwei Arten von Präzipitationsreaktionen, die routinemäßig in Labors verwendet werden, um Proteine wie Antigene zu identifizieren.
Was ist Immunpräzipitation?
Immunpräzipitation ist eine Technik zur Präzipitation eines Proteins aus einer Lösung unter Verwendung eines spezifischen Antikörpers. Manchmal wird diese Technik auch als individuelle Protein-Immunpräzipitation bezeichnet. Die Immunpräzipitation verwendet einen Antikörper, um ein ausgewähltes interessierendes Protein aus Zelllysat zu isolieren. Der Antikörper reinigt sein spezifisches Zielprotein oder Antigen aus einer Mischung. Der Antikörper bindet an das Protein und der Antikörper-Antigen-Komplex wird aus der Probe herausgezogen. Im experimentellen Aufbau wird der Antigen-Antikörper-Komplex unter Verwendung von Protein A/G-gekoppelter Agarose oder magnetischen Kügelchen herausgezogen. Später werden die Kügelchen gewaschen und das interessierende Protein eluiert. Das durch Immunpräzipitation erh altene gereinigte Protein oder Antigen wird durch eine Vielzahl von Techniken verifiziert, wie z. B. Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) und Western Blot (WB).
Abbildung 01: Immunpräzipitation
Darüber hinaus können isolierte Proteine oder Antigene durch Massenspektrometrie quantifiziert und identifiziert werden, indem enzymatische Verdauungsmuster basierend auf der Primärsequenz verwendet werden. Bevor Sie mit einem Immunpräzipitationsexperiment beginnen, müssen Sie einige Überlegungen anstellen: Auswahl des Methodenformats, Bindung von Proteinen und Beads, Auswahl des richtigen primären Antikörpers und Isotyps sowie Negativkontrolle.
Was ist Koimmunpräzipitation?
Coimmunopräzipitation ist eine Technik, bei der intakte Proteinkomplexe mithilfe eines spezifischen Antikörpers aus der Lösung ausgefällt werden. Die Coimmunpräzipitation funktioniert im Allgemeinen durch die Auswahl eines spezifischen Antikörpers, der auf ein bekanntes Protein (Antigen) abzielt, von dem angenommen wird, dass es ein Mitglied eines größeren Proteinkomplexes ist. Indem man mit einem spezifischen Antikörper auf das bekannte Mitglied abzielt, ist es möglich, den gesamten Proteinkomplex aus der Lösung zu ziehen. Dies ermöglicht die Identifizierung der unbekannten Mitglieder des Komplexes. Das Konzept, Proteinkomplexe aus der Lösung zu ziehen, wird manchmal als „Pull-down“-Mechanismus bezeichnet.
Abbildung 02: B Coimmunopräzipitation
Coimmunopräzipitation ist eine leistungsstarke Technik zur Analyse von Protein-Protein-Wechselwirkungen. Der Hauptzweck der Coimmunpräzipitation ist die Identifizierung von Interaktionspartnern wie Liganden, Cofaktoren oder Signalmolekülen für das interessierende Protein. Darüber hinaus ist die Koimmunpräzipitation eine effektive Technik, die verwendet wird, um Proteine aus Serum, Zelllysat, homogenisiertem Gewebe oder konditionierten Medien zu trennen.
Was sind die Ähnlichkeiten zwischen Immunpräzipitation und Coimmunpräzipitation?
- Immunpräzipitation und Coimmunpräzipitation sind zwei Arten von auf Präzipitationsreaktionen basierenden Techniken.
- Beide Techniken können verwendet werden, um das Zielantigen durch einen spezifischen Antikörper zu identifizieren.
- Beide Techniken hängen stark von der Antigen-Antikörper-Interaktion ab.
- Sie werden routinemäßig in klinischen Labors verwendet.
Was ist der Unterschied zwischen Immunpräzipitation und Coimmunpräzipitation?
Immunpräzipitation ist eine Technik, die ein Protein mithilfe eines spezifischen Antikörpers aus der Lösung präzipitiert, während die Coimmunpräzipitation eine Technik ist, die intakte Proteinkomplexe mithilfe eines spezifischen Antikörpers aus der Lösung präzipitiert. Dies ist also der Hauptunterschied zwischen Immunpräzipitation und Coimmunpräzipitation. Darüber hinaus wird die Immunpräzipitation häufiger in Labors verwendet, während die Coimmunpräzipitation in Labors nicht häufig verwendet wird.
Die folgende Infografik zeigt die Unterschiede zwischen Immunpräzipitation und Coimmunpräzipitation in tabellarischer Form zum direkten Vergleich.
Zusammenfassung – Immunpräzipitation vs. Coimmunpräzipitation
Immunpräzipitation und Coimmunpräzipitation sind zwei Arten von auf Präzipitationsreaktionen basierenden Techniken, die von der Antigen-Antikörper-Wechselwirkung abhängen. Die Immunpräzipitationstechnik präzipitiert ein Protein aus der Lösung unter Verwendung eines spezifischen Antikörpers, während die Coimmunpräzipitationstechnik intakte Proteinkomplexe unter Verwendung eines spezifischen Antikörpers aus der Lösung präzipitiert. Dies fasst also den Unterschied zwischen Immunpräzipitation und Coimmunpräzipitation zusammen.
